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Molecular Probes™ Ester de TFP Alexa Fluor™ 488

Ester de TFP Alexa Fluor™ 488

Marque:  Molecular Probes™ A37563

Code nomenclature Nacres: NA.32

Informations supplémentaires : Poids : 0.00300kg

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Code produit. 13473309

  • 4320.00€ / 25mg


Expédition estimée
04-09-2020
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Description

Description

Les colorants Alexa Fluor™ sont des molécules réactives qui peuvent être utilisées pour ajouter un marquage fluorescent aux amines primaires (R-NH2) des protéines, des oligonucléotides modifiés par des amines et d’autres molécules contenant des amines. Les conjugués Alexa Fluor™ résultants présentent une fluorescence plus lumineuse et une photostabilité plus élevée que les conjugués d’autres fluorophores similaires sur le plan spectral. L’ester de TFP Alexa Fluor™ 488 produit un conjugué avec excitation/émission de 495/515 nm spectralement similaire aux conjugués fluorescéine (FITC) et Cy2.

Les colorants Alexa Fluor™ sont disponibles avec des émissions de fluorescence qui couvrent le spectre visible et presque IR (voir les séries de colorants Alexa Fluor™—mention 1,1 dans le manuel The Molecular Probes™) et fournissent la combinaison unique de solubilité dans l’eau et d’insensibilité au pH entre les pH 4 et 10 pour la compatibilité dans divers environnements biologiques.

Les esters de TFP (tétrafluorophényl) sont une amélioration par rapport à la chimie de l’ester succinimidyle (ester SE ou NHS) généralement utilisée pour fixer des fluorophores ou des haptènes aux amines primaires des biomolécules. Les deux chimies réactives produisent la même forte liaison amide entre le colorant ou l’haptène et le composé d’intérêt, mais les esters de TFP sont moins sensibles à l’hydrolyse spontanée pendant les réactions de conjugaison. Les esters de TFP Alexa Fluor™ sont stables pendant plusieurs heures au pH de base généralement utilisé pour les esters de succinimidyle de longue durée de réaction.

Réaction de conjugaison typique
Vous pouvez conjuguer des réactifs amino-réactifs avec pratiquement n’importe quelle protéine ou n’importe quel peptide ; le protocole fourni est optimisé pour des anticorps IgG. Vous pouvez adapter la taille de la réaction à n’importe quelle quantité de protéine, mais la concentration de la protéine doit être d’au moins 2 mg/ml pour des résultats optimaux. Nous recommandons d’essayer trois degrés différents de marquage, en utilisant trois rapports molaires différents du réactif sensible à la protéine.

L’ester de TFP Alexa Fluor™ est typiquement dissolu dans du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre de haute qualité (D12345) et la réaction est effectuée dans un tampon de bicarbonate de sodium de 0,1–0,2 M, de pH 8,3 et à température ambiante pendant 1 heure. Parce que le pKa de l’amine terminale est inférieur à celui du groupe amino-epsilon de lysine, vous pouvez atteindre un marquage plus sélectif de l’extrémité de l’amine en utilisant un tampon proche du pH neutre.

Purification des conjugués
Les anticorps marqués sont typiquement séparés du colorant Alexa Fluor™ libre à l’aide d’une colonne de filtration sur gel, comme la colonne Sephadex™ G-25, la colonne BioGel™ P-30 ou une colonne équivalente. Pour des protéines beaucoup plus grandes ou plus petites, sélectionnez un milieu de filtration sur gel ayant un seuil de poids moléculaire approprié ou purifiez par dialyse.

En savoir plus sur le marquage de protéines et d’anticorps
Nous offrons une large sélection de kits de marquage d’anticorps et de protéines Molecular Probes™ pour convenir à votre produit de départ et à votre configuration expérimentale. Consultez Marquage d’anticorps de A à Z ou utilisez notre Outil de sélection de chimie de marquage pour d’autres choix. Pour en savoir plus sur nos kits de marquage, lisez les Kits pour le marquage des protéines et des acides nucléiques — Section 1,2 dans le manuel Molecular Probes™.

Nous ferons un conjugué personnalisé pour vous
Si vous ne trouvez pas ce que vous cherchez dans notre catalogue en ligne, nous vous préparerons un conjugué d’anticorps ou de protéines sur mesure. Notre service de conjugaison personnalisé est efficace et confidentiel et nous sommes certifiés ISO 9001:2000.
Spécification

Spécification

1 tube
Store dessicated at -20°C, upon reciept
Alexa Fluor™
Room Temperature
25 mg
Vidéos
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.