Invitrogen™ Ligne cellulaire LEF/TCF-bla HCT-116 CellSensor™

Description

La signalisation Wnt via la bêta-caténine joue un rôle central dans le développement et l’homéostasie. Cette voie est invariablement perturbée dans les tumeurs colorectales et généralement affectée par la mutation dans d’autres cancers. La liaison du ligand Wnt et l’activation des récepteurs transmembranaires Frizzled ont transduit le signal en une protéine cytoplasmique appelée protéine disheveled qui inhibe ensuite la sérine/thréonine kinase glycogène synthase-3 bêta (GSK-3B). Ce signal conduit à l’inactivation et à la dissociation fonctionnelles d’un complex de destruction de bêta-caténine multiprotéique composé de la protéine suppresseur de tumeur adénomateux polypose coli (APC), GSK-3B et d’un échafaudage d’Axin. Ceci provoque une déphosphorylation et une dissociation de la bêta-caténine. La b-caténine non phosphorylée est stabilisée et s’accumule dans le cytoplasme de la cellule. La bêta-caténine s’associe ensuite à la famille facteur de cellule T (TCF)/facteur d’amélioration lymphoïde (LEF) dans le noyau provoquant la transcription et l’expression de gènes cibles tels que c-Myc, c-jun, Fra et cycline D1. La lignée cellulaire LEF/TCF-bla HCT-116 CellSensor™ contient un gène rapporteur de la bêta-lactamase sous contrôle du LEF/TCF intégré de façon stable aux cellules HCT-116. HCT-116 est une lignée cellulaire du cancer du côlon porteuse d’une mutation de gain de fonction dans le gène de la bêta-caténine (suppression de l’acide aminé Serine45) qui empêche la dégradation de la protéine bêta-caténine conduisant à l’activation constitutive des gènes en aval. Ainsi, cette lignée cellulaire exprime constitutivement la bêta-lactamase qui peut être stimulée ou inhibée davantage (p. ex., à l’aide de l’ARNsi Stealth RNAi™). Cette lignée cellulaire a également été testée dans diverses conditions expérimentales, notamment la concentration de DMSO, le nombre de cellules, le temps de stimulation et le temps de chargement du substrat. Clients universitaires et à but non lucratif, veuillez vous renseigner sur les tarifs spéciaux.