Invitrogen™ Colorant de viabilité fixable eBioscience™ eFluor™ 450

Description

• Contrairement à la 7-AAD et à l’iodure de propidium, les cellules marquées avec les colorants de viabilité fixables peuvent être lavées, fixées, perméabilisées et colorées pour des antigènes intracellulaires, et ce sans perte d’intensité de coloration des cellules mortes
• Ainsi, l’utilisation de ces colorants permet d’exclure les cellules mortes de l’analyse lorsque les cibles intracellulaires sont étudiées
• Le colorant de viabilité fixable eFluor™ 450 peut être excité par le faisceau laser violet (405 nm) et présente un pic d’émission à 450 nm qui peut être détecté à l’aide d’un filtre passe-bande 450/50 (équivalent à eFluor™ 450 ou Pacific Blue™)
• Pour la compensation, il est recommandé d’utiliser un échantillon des cellules d’intérêt colorées à l’aide du colorant de viabilité fixable
• Si le pourcentage de cellules mortes est censé être inférieur à 5 %, il est alors recommandé de prendre une petite aliquote de cellules et de les chauffer à 65°C pendant 1 minute, puis de les placer immédiatement sur la glace pendant 1 minute
• Après ce traitement, les cellules tuées par la chaleur peuvent être combinées selon le ratio 1/1 avec des cellules vivantes, puis colorées avec le colorant de viabilité fixable
• Le colorant de viabilité fixable eFluor™ 450 est fourni sous forme de solution pré-diluée préparée dans du DMSO anhydre de haute qualité
• Il doit être protégé de la lumière et de l’humidité
• Stocker à -70°C avec un dessiccant, il peut être décongelé jusqu’à 20 fois
• Laisser le flacon s’équilibrer à température ambiante avant ouverture