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Invitrogen™ GeneRacer™ Kit with AMV RT and TOPO TA Cloning™ Kit for Sequencing

Technique avancée RACE (amplification rapide des extrémités d’ADNc) qui améliore l’efficacité des extrémités d’ADNc 5’ et 3’ pleine longueur d’amplification.

Marque:  Invitrogen™ L150001

876.04 EUR valable jusqu'au 2024-03-29
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Code nomenclature Nacres: NA.54

Informations supplémentaires : Poids : 0.00525kg Transport : UN number : 2821 Chem class : 6.1 Pack group : II

Code produit. 10728273

  • 1314.00€ / 5mL
Expédition estimée: 19-04-2024
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Description

Description

Le kit GeneRacer est disponible avec la transcriptase inverse (RT) SuperScript III pour améliorer l’amplification de l’extrémité 5’ de pleine longueur à partir de l’ARNm long et complexe. La portion RNase H de la transcriptase inverse (RT) SuperScript III a été mutée pour éviter le clivage d’ARNm pendant la synthèse d’ADNc. Cela augmente la taille et le rendement de l’ADNc. La transcriptase inverse (RT) SuperScript III est plus thermostable que les transcriptases inverses de type sauvage. Ceci assure une transcription inverse à des températures élevées en relaxant la structure secondaire des modèles complexes et en autorisant l’exécution de la synthèse d’ADNc.

  • Générer l’ADNc à partir de transcripts faisant au moins 10 kb de longueur
  • Obtenir une extrémité 5’ de pleine longueur pour des transcripts rares à moins de 30 copies par cellule
  • Cloner des extrémités 5’ et 3’ de pleine longueur pour créer une séquence d’ADNc complète

  • S’assure que seuls les transcripts contenant des extrémités d’ADNc pleine longueur sont amplifiés (1,2).
  • Le protocole avancé commence au niveau de l’ARN en ciblant spécifiquement l’ARNm coiffé en 5’.
  • Au cours des étapes suivantes, la coiffe est éliminée et remplacée par l’oligo d’ARN GeneRacer.
  • Lors de la transcription inverse, la séquence d’oligo d’ARN GeneRacer est incorporée à l’ADNc.
  • Seul l’ADNc faisant l’objet d’une transcription inverse complète contiendra cette séquence connue.
  • La PCR 5’ RACE est alors effectuée à l’aide de l’amorce GeneRacer 5’ propre à la séquence d’oligo d’ARN GeneRacer et d’une amorce génétique.
  • Le résultat est un ADN amplifié contenant la séquence d’ADNc 5’ pleine longueur.
  • Pour démontrer la capacité du kit GeneRacer à capturer l’extrémité d’ADNc 5fi de pleine longueur, les extrémités 5fi des gènes dotées de sites connus de démarrage transcriptionnel ont été amplifiées.
  • En commençant par l’ARN total et conformément au protocole GeneRacer, les transcripts longs (10 kb) et les messages rares présents à 0,01 %, ou 30 copies par cellule, ont été amplifiés.

Clonage, PCR et PCR en temps réel, transcription inverse, bibliothèques d’ADNc et construction d’une bibliothèque

Spécification

Spécification

TOP10
Chaque kit GeneRacer™ contient la boîte GeneRacer™, une boîte de transcriptase inverse, des colonnes S.N.A.P.™ et un kit de clonage TOPO™. Le kit GeneRacer™ et la boîte de transcriptase inverse contiennent suffisamment de réactifs pour cinq réactions d’ADNc et une réaction de contrôle et suffisamment d’amorces pour 50 réactions de PCR. La boîte GeneRacer™ contient les enzymes CIP, TAP, RNA ligase T4 et leurs tampons, le GeneRacer™ ARN Oligo (pré-aliquoté et lyophilisé), les amorces GeneRacer™ et les amorces nichées, l’inhibiteur de la ribonucléase recombinante RNaseOUT™, le phénol / chloroforme, le glycogène de moule, l’eau stérile et les contrôles. Stockage à -20°C. La boîte SuperScript™ III RT comprend une transcriptase inverse SuperScript™ III, un tampon premier brin 5X, un DTT, une RNase H, des amorces aléatoires, l’amorce Oligo(dT) GeneRacer™ et le mélange dNTP. Stock
Transcription inverse
GeneRacer™, TA Cloning™, TOPO™
1 kit
TOPO TA
Kit
Chaque kit GeneRacer contient la boîte GeneRacer, une boîte de transcriptase inverse, des colonnes S.N.A.P. et un kit de clonage TOPO. Le kit GeneRacer et la boîte de transcriptase inverse contiennent suffisamment de réactifs pour cinq réactions d’ADNc et une réaction de contrôle et suffisamment d’amorces pour 50 réactions de PCR. La boîte GeneRacer contient les enzymes CIP, TAP, RNA ligase T4 et leurs tampons, le GeneRacer ARN Oligo (pré-aliquoté et lyophilisé), les amorces GeneRacer et les amorces nichées, l’inhibiteur de la ribonucléase recombinante RNaseOUT, le phénol / chloroforme, le glycogène de moule, l’eau stérile et les contrôles. Conserver à -20°C. La boîte SuperScript III RT comprend une transcriptase inverse SuperScript III, un tampon premier brin 5X, un DTT, une RNase H, des amorces aléatoires, l’amorce Oligo(dT) GeneRacer et le mélange dNTP. Conserver à -20°C. La boîte Cloned AMV RT comprend une transcriptase inverse clo
Kit de clonage
pCR4-TOPO TA
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