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OPTIZYME™ PfoI, Fisher BioReagents™

Code produit. 11924832
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Quantité:
200 U
Conditionnement:
1 pièce
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Code produit. 11924832

Marque: Fisher BioReagents BP80771

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Description

5’...T^C C N G G A...3’
3’...A G G N C C^T...5’

Fourni avec : Tampon OPTIZYME 10X4
Conditions pour 100 % d’activité :

  • Tampon OPTIZYME 1X 4 : Tris-acétate 33 mM (pH 7,9 à 37°C), 10 mM Mg-acétate, 66 mM K-acétate et 0,1 mg/ml BSA
  • Laissez incuber à 37°C
Activité enzymatique dans les tampons OPTIZYME :
  • Tampon 1 : 0 - 20 %
  • Tampon 2 : 20 - 50 %
  • Tampon 3 : 50 - 100 %
  • Tampon 4 : 100 %
  • Tampon 5 : 0 - 20 %
Tampon de stockage :
  • Tris-HCl 10 Mm (pH 7,4 à 25°C), 100 mM Kcl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA et 50 % (v/v) glycérol
  • Ligature et nouveau clivage :
  • Plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une surdigestion 50 fois plus importante avec PfoI.
  • Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :
  • Un minimum de 10 unités de PfoI est requis pour la digestion complète de 1 μg d’ADN lambda incorporé à l’agarose en 16 heures.
  • Remarque :
    • Le clivage du PfoI est altéré par le chevauchement de la méthylation du dam et il est bloqué par le chevauchement de la méthylation du dcm. Pour éviter la méthylation du dam et du dcm, utilisez une souche de dam- et de dcm-.
  • Extrémités compatibles : EcoRII, SexAI, BssKI
  • Effets de méthylation :
  • Dam : Risque de chevauchement - altération du clivage
    • 5’...TCCNGGGm6A TC...3’
  • 3’…AGGNCCC Tm6AG...5’
  • (Le clivage est altéré)
  • Dcm : Risque de chevauchement - bloqué
    • 5’...TCm5CA GGA...3’
  • 3’...AG GTm5CCT...5’
  • (Le clivage est bloqué)
  • CpG : Risque de chevauchement - bloqué
    • 5’...TCm5C GGGA...3’
  • 3’...AG Gm5CCCT...5’
  • (Le clivage est bloqué)
  • EcoKI : Ne se chevauche jamais - aucun effet
  • EcoBI : Ne se chevauche jamais - aucun effet

    • TRUSTED_SUSTAINABILITY

    Spécification

    Concentration 10 U/μl
    Composants >50% Glycerin, 25 to 50% Water
    Température de l’incubateur 37°C
    pH 7.4
    À utiliser avec (application) > 90 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une digestion excessive multipliée par 10 avec Pfo I
    Tampon de stockage 10mM Tris HCl (pH 7.4 at 25°C), 100mM KCl, 1mM DTT, 1mM EDTA, 0.2mg/mL BSA, 50% Glycerol
    Contenu et stockage Garder le récipient hermétiquement fermé
    Quantité 200 U
    Site de coupe T.CCNGGA
    Type de produit PfoI
    Forme Liquide
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