OPTIZYME™ XhoI, Fisher BioReagents™

5’....C^T C G A G...3’
3’....G A G C T^C...5’

Fourni avec : Tampon OPTIZYME 10X5
Conditions pour 100 % d’activité :

• Tampon OPTIZYME 1X 5 : 10 mM de tris-HCl (pH 8,5 à 37°C), 10 mM de MgCl₂, 100 mM de KCl et 0,1 mg/ml de BSA
• Laissez incuber à 37°C

• Tampon 1 : 0 - 20 %
• Tampon 2 : 50 - 100 %
• Tampon 3 : 50 - 100 %
• Tampon 4 : 20 - 50 %
• Tampon 5 : 100 %

• Tris-HCl 10 mM (pH 7,4 à 25°C), 100 mM KCI, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA et 50 % (v/v) glycérol
• Ligature et nouveau clivage :
• Plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une surdigestion 50 fois plus importante avec XhoI.
• Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :
• Un minimum de 5 unités de XhoI est requis pour la digestion complète de 1 μg d’ADN lambda incorporé à l’agarose en 16 heures.
• Remarque :
• Les plasmides surenroulés peuvent nécessiter jusqu’à 5 fois plus de XhoI que l’ADN linéaire pour une digestion complète.
• Extrémités compatibles : BauI, Eco88I, SalI, SmoI
• Effets de méthylation :
• Dam : Ne se chevauche jamais - aucun effet
• Dcm : Ne se chevauche jamais - aucun effet
• CpG : Se chevauche complètement - altération du clivage
• CTCGAG

(clivage altéré)
EcoKI : Ne se chevauche jamais - aucun effet
EcoBI : Ne se chevauche jamais - aucun effet