L’un des outils les plus fréquemment utilisés dans un laboratoire typique est la pipette à déplacement d’air ou à coussin d’air. Pratique et facile à utiliser, elle peut être équipée d’embouts jetables pour minimiser le risque de contamination croisée entre les échantillons.
Savez-vous comment choisir la pipette de taille correcte pour une précision maximale ? Commençons par examiner le fonctionnement mécanique.
Les pipettes à déplacement d’air reposent sur un principe simple :
Un piston de diamètre constant est poussé à travers un joint pour déplacer une colonne d’air ; le mouvement de l’air entraîne à son tour le déplacement des liquides dans et hors de l’embout pipette jetable.
Un coussin d’air existe à l’intérieur de l’embout pipette entre le liquide et l’extrémité de la pipette ; le liquide ne touche jamais la pipette elle-même.
Après avoir fixé un embout, le piston est déplacé depuis sa position de repos à travers le joint pour expulser l’air de l’embout pipette.
L’embout est ensuite immergé juste sous la surface du liquide à aspirer ; le piston à ressort revient à sa position de repos, créant un vide qui remplit l’embout de liquide.
Les pipettes à volume réglable utilisent un mécanisme à vis pour modifier la longueur de course et régler le volume à 50 % de la capacité nominale.
Pour les pipettes ayant des volumes nominaux de 100 µL ou plus, l’inexactitude d’une pipette à déplacement d’air est considérée comme un volume constant sur toute la plage de la pipette. La norme ISO 8655 Partie 2 indique cette valeur ≤ ±0,8 % de la capacité nominale (c.-à-d. ≤ ±0,8 µL pour une pipette de 100 µL) et elle dépend principalement de la mécanique de la pipette. Pour des volumes plus petits, l’inexactitude augmente en raison de la compressibilité de l’air et d’autres facteurs.
Généralement, les fiches techniques ou les catalogues présentent la précision en pourcentage du volume nominal, souvent sans informations supplémentaires, ce qui oblige l’utilisateur à en déduire les implications. Lors de l’estimation du pourcentage de précision pour des volumes partiels, le numérateur (la quantité d’inexactitude) reste le même ; le dénominateur (le volume réglé) change.
Précision des volumes partiels pour une pipette de 100 µL
| Volume Setting | Percentage of Nominal Capacity | Volume of Inaccuracy | Pipetted Volume Accuracy |
|---|---|---|---|
| 100 µL | 100% | ≤± 0.8 µL | ≤± 0.8% |
| 75 µL | 75% | ≤± 0.8 µL | ≤± 1.1% |
| 50 µL | 50% | ≤± 0.8 µL | ≤± 1.6% |
| 20 µL | 20% | ≤± 0.8 µL | ≤± 4% |
| 10 µL | 10% | ≤± 0.8 µL | ≤± 8% |
Il est clair qu’une pipette à déplacement d’air est la plus précise lorsqu’elle est utilisée à sa capacité nominale ou proche de celle-ci. De plus, la précision diminue considérablement lorsque le volume réglé est inférieur à 50 % de la capacité nominale. La plupart des pipettes indiquent donc une plage de volumes avec des limites supérieure et inférieure.
La quantité de liquide à pipeter se situe souvent dans la plage de plusieurs pipettes différentes. Par exemple, 20 µL pourraient être mesurés avec des pipettes de 2 à 20 µL, 5 à 50 µL ou 10 à 100 µL. Le volume serait pipeté avec la plus grande précision en utilisant la pipette de 2 à 20 µL. Si cette taille n’est pas disponible, choisissez la pipette avec la capacité la plus proche du volume requis. Dans ce cas, la pipette de 5 à 50 µL est un meilleur choix que celle de 10 à 100 µL.
Si votre laboratoire ne dispose que de pipettes avec des plages légèrement chevauchantes, l’ajout d’une ou deux pipettes supplémentaires avec plus de chevauchement peut améliorer la précision de vos mesures.
La BRAND Transferpette S est une pipette manuelle à canal unique disponible en dix tailles de volume réglables (de 0,1 à 1 µL jusqu’à 1 à 10 ml); ces tailles couvrent presque toute la plage de 0,5 µL à 10 ml et chevauchent les moitiés supérieures des plages de pipettes. De même, les pipettes manuelles Transferpette à 8 et 12 canaux sont disponibles en cinq plages de volumes réglables (de 0,5 à 10 µL jusqu’à 30 à 300 µL) pour des volumes d’échantillon de 1 à 300 µL.
La BRAND Transferpette est également disponible en version électronique avec des options similaires. Cinq pipettes électroniques à canal unique Transferpette couvrent des plages de volume de 0,5 à 10 µL jusqu’à 250 µL à 5 ml; cinq modèles multicanaux couvrent des volumes de 0,5 à 10 µL jusqu’à 15 à 300 µL.
REMARQUE: Dans la plupart des publications, le terme « précision » est utilisé pour désigner le degré d’inexactitude. Pour rester cohérents avec les autres publications, nous utilisons « précision » dans cet article lorsque nous faisons référence à des pourcentages.
