Invitrogen™ Exonuclease I

L’exonucléase I est particulièrement utile dans la préparation des produits de PCR pour les applications impliquant des méthodes de séquençage ou d’étiquetage¹. Généralement, les amorces en excès et tout autre ADN simple brin étranger présent dans les produits PCR interfèrent avec les réactions enzymatiques ultérieures impliquant la synthèse de l’ADN. Les propriétés hydrolytiques de l’exonucléase I dégradent l’ensemble de l’ADN simple brin présent dans le mélange PCR, ce qui permet d’utiliser le produit plus efficacement dans d’autres applications.

• Hydrolyse l’ADN simple brin dans la direction 3’-5’, libérant des 5’-mononucléotides et laissant intact le terminal 5’-dinucléotide ; l’hydrolyse est en cours de traitement et ne peut pas se poursuivre si le terminal 3‘ est phosphorylé
• Utiliser pour mesurer le clivage endonucléolytique de l’ADN simple brin circulaire fermé en covalence et réagit avec une endonucléase d’intérêt²
• Convient également à la mesure de l’activité de l’hélicase à ADN³
• En combinaison avec la phosphatase alcaline aux crevettes (Mfr. N°78390) pour la déphosphorylation du dNTP, l’utilisation de méthodes de purification alternatives, telles que les colonnes, les gels ou les séparations magnétiques, est complètement éliminée

Source : Souche d’E. coli contenant un clone surproducteur d’exonucléase I d’E. coli
Propriétés :

• Poids moléculaire : 55 kDa
• Inactivation par la chaleur : 80° pour 15 min.
• Se dégrade en dinucléotides terminaux
• Dégrade l’ADN glycosylé
• Température optimale : 37°C

• Pureté supérieure à 95 %, comme déterminé par SDS-PAGE
• Testé pour détecter les endonucléases contaminantes, les exonucléases à double brin et les ribonucléases

• Conc. standard : 10 unités/μl, réf. 70073
• Haut conc. : 20 unités/μl, réf. 72073

Élimination de l’ADN simple brin résiduel contenant un 3’ terminus ; mesure du clivage endonucléolytique de l’ADNsb circulaire covalente ; mesure de l’activité de l’hélicase de l’ADN