Invitrogen™ Kit ELISA d’activation AKT/ERK multi-espèces InstantOne™

Description

Le test ELISA InstantOne™ est spécialement conçu pour la mesure précise de l’ERK 1/2 et de l’AKT 1/2/3 phosphorylé humain, de souris et de hamster dans les lysats cellulaires. La détection de l’ERK 1/2 et de l’AKT 1/2/3 de rat est également attendue. Le kit ELISA InstantOne™ permet une analyse rapide des échantillons en une heure environ. Tous les réactifs utilisés dans un sandwich ELISA traditionnel sont ajoutés en solution à une plaque suivie d’une étape de lavage et d’une détection avec le substrat colorimétrique TMB.

La kinase régulée par signal extracellulaire (ERK) est le membre fondateur et un composant clé de la voie de la protéine kinase activée par des agents mitogènes (MAPK) classique. ERK1 (p44, MAPK3) et ERK2 (p42, MAPK2) sont tous deux activés via la voie MAPK/ERK, qui est en aval de divers types de récepteurs Tyrosine (RTK) ou GPCRs. MEK, une Ser/Thr et Tyr kinase, active ERK par phosphorylation de ses motifs TxY, à savoir Thr202/Tyr204 et Thr185/Tyr187 d’ERK1 et ERK2, respectivement. Une fois activé, le ERK phosphoryle une variété de protéines qui régulent les processus cellulaires tels que la division, la prolifération, la survie, la différenciation, l’apoptose, la motilité et le métabolisme des cellules. L’AKT, qui existe sous forme des isoformes multiples, est l’une des principales kinases activées par le phosphoinositide 3-kinase (PI3K). L’activation du PI3K entraîne la génération de phosphatidylinositol (3,4,5)-triphosphate (PIP3). Ces deuxièmes messagers lipidiques se lient au domaine d’homologie à la pleckstrine de l’AKT pour favoriser sa translocation à la membrane plasmique en vue de son activation par phosphorylation à Thr308 et Ser473 par PDK1 et au complexe mTOR TORC2, respectivement. La phosphorylation sur ces deux sites est nécessaire pour une activation complète de l’activité Ser/Thr kinase de l’AKT. AKT phosphoryle sur 50 substrats connus, y compris GSK3, AS160, PRAS40, TSC1, SDC2, Raf-1, Bad, la famille de facteurs de transcription FOXO et PFK2. En raison de son rôle critique établi dans de nombreux processus biologiques, l’AKT est une cible fréquente du développement de médicaments liés à l’oncologie.