Invitrogen™ DNase I Ambion™ (sans RNase)

La DNase I fonctionne en hydrolysant les liaisons phosphodiester, produisant des mononucléotides et des oligonucléotides avec un groupe de 5’-phosphate et de 3’-hydroxyle. La DNase I sans RNase est recommandée pour dégrader l’ADN en présence d’ARN, et est essentielle en l’absence de RNase pour maintenir l’intégrité de l’ARN. Ainsi, la DNase I est fréquemment utilisée pour éliminer le modèle d’ADN suite à une transcription in vitro et pour éliminer l’ADN contaminant dans les préparations d’ARN total (en particulier des cellules transfectées susceptibles de contenir de l’ADN plasmide) utilisées pour les dosages de protection de la ribonucléase, la contraction de la bibliothèque d’ADNc et la RT-PCR.

• Testée pour détecter la RNase contaminante et l’activité des protéases
• La fonctionnalité est déterminée par la digestion de l’ADN génomique humain, suivie de la PCR quantitative en temps réel afin de détecter tout ADN non digéré
• Exige des cations bivalents (Mg²⁺ et Ca²⁺ à environ 5 mM et 0,5 mM) pour optimiser l’activité et son pH optimal est 7,8.
• Définition d’une unité : Une unité correspond à la quantité d’enzyme nécessaire pour dégrader entièrement 1 μg d’ADN en 10 minutes à 37°C, ce qui équivaut à 0,04 Kunitz.

Comme alternative à la DNase I bovine, envisagez la DNase I recombinante (n° de catalogue AM2235). Si vous recherchez une DNase plus active et tolérante au sel, consultez les produits TURBO™ DNase (n° de catalogue AM2239 et AM2238).

PCR et PCR en temps réel, PCR en temps réel (qPCR), transcription inverse