Invitrogen™ MICROBExpress™ Bacterial mRNA Enrichment Kit

Le kit d’enrichissement en ARNm bactérien MICROBExpress™ permet la purification de l’ARNm bactérien en éliminant l’ARNr de l’ARN total. Les réactifs fournis permettent 20 purifications d’ARNm, chacune à partir de 10 µg d’ARN total. Caractéristiques du kit MICROBExpress™ :

• Augmente considérablement la sensibilité des analyses microarray et autres procédures
• Élimine >95 % des ARNr 16S et 23S de l’ARN bactérien
• Procédure simple qui dure moins de 2 heures
• Fonctionne avec de nombreuses bactéries à gram positif et à gram négatif

Purification rapide de l’ARNm bactérien
Jusqu’à présent, il était quasiment impossible d’isoler l’ARNm de bactéries. Le kit MICROBExpress™ utilise une nouvelle technologie qui élimine >95 % de l’ARNr 16S et 23S de l’ARN total présent dans E. coli et d’autres espèces bactériennes. Le kit convient à la purification de l’ARNm d’un grand nombre d’espèces de bactéries Gram positif et Gram négatif. L’ARNm isolé avec le kit MICROBExpress™ constitue un meilleur modèle dans la synthèse d’ADNc marqué pour les analyses de grille et convient parfaitement à la RT-PCR quantitative, aux applications Northern et à la construction d’une bibliothèque d’ADNc. L’élimination efficace de l’ARNr 16S et 23S de l’ARN bactérien augmente considérablement la sensibilité dans les procédures en aval (voir la figure).

Commencer avec n’importe quel échantillon d’ARN total
Ce mélange d’ARN total de cellules bactérienne-hôte peut être obtenu par une variété de méthodes d’isolement d’ARN. Le kit MICROBExpress™ élimine spécifiquement les ARNr ; les petits ARN, c.-à-d. ARNt et ARNr 5S, ne sont pas éliminés. Si le produit de départ est de l’ARN total dépourvu de petits ARN, le kit MICROBExpress™ produit un niveau d’enrichissement en ARNm le plus élevé possible (voir les accessoires). Au cours de la première étape de la procédure du kit MICROBExpress™, l’ARN total est mélangé avec un ensemble optimisé d’oligonucléotides de capture qui se fixent aux ARNr bactériens 16S et 23S. Puis les hybrides d’ARNr sont éliminés de la solution à l’aide de microbilles magnétiques transformées en dérivés. L’ARNm reste dans le surnageant et est récupéré par précipitation à l’éthanol.

Produits accessoires
Ce kit nécessite un support magnétique. Plusieurs formats sont disponibles, notamment le support magnétique à un seul emplacement (N° de catalogue AM10026), le support magnétique pour 6 tubes (N° de catalogue AM10055) et les supports magnétiques pour 96 puits (N° de catalogue AM10027 et AM10050). Le kit RiboPure™-Bacteria (N° de cat. AM1925) est idéal pour la purification d’ARN total dépourvu de petits ARN. Les petits ARN peuvent être retirés de l’ARN total à l’aide du kit MEGAclear™ (n° de cat. AM1908).