Invitrogen™ Solution de stabilisation RNAlater™

La solution de stabilisation d’ARN RNAlater stabilise et protège l’ARN cellulaire en échantillons de tissu intacts, décongelés, éliminant ainsi le besoin de traiter immédiatement les échantillons tissulaires ou de congeler les échantillons dans de l’azote liquide pour traitement ultérieur. Les fragments de tissus peuvent être récoltés et submergés dans la solution de stabilisation d’ARN RNAlater pour conservation sans compromettre la qualité ou la quantité d’ARN obtenu après l’isolement d’ARN ultérieur. Avantages de la solution de stabilisation de l’ARN RNAlater :

• Efficacité : stabilise l’ARN pendant 1 jour à 37°C, 1 semaine à 25°C, 1 mois à 4°C, ou indéfiniment à -20°C
• Simplicité : un seul réactif qui inactive immédiatement les ARNases et stabilise l’ARN dans les tissus ou les cellules
• Pratique : pas besoin de congeler les échantillons dans de l’azote liquide ni de replacer les échantillons en vitesse dans le congélateur du laboratoire
• Mobilité : parfait pour le prélèvement tissulaire ’’sur site’’
• Polyvalence—compatible avec de nombreuses procédures d’isolation d’ARN, dont la plupart des kits d’isolation d’ARN

Applicationsla solution de stabilisation d’ARN
RNAlater a été évaluée sur de nombreux tissus de mammifères, des végétaux, sur les bactéries E. coli, Xenopus, sur des poissons et sur Drosophila. Elle est idéale dans les cas suivants :

• Protection de l’intégrité de l’ARN dans les tissus riches en ARNase
• Prélèvement d’échantillons à partir de différents moments sans avoir à traiter les échantillons à partir de chaque moment immédiatement
• Archivage des tissus pour la microdissection future
• Immersion de cavités ou d’organes animaux pour stabiliser l’ARN pendant de longues procédures de dissection
• Prélèvement d’échantillons dans des lieux (par exemple, hôpitaux, sites de terrain, navette spatiale) où l’isolement immédiat de l’ARN n’est pas possible
• Expédition d’échantillons sur glace humide ou même à température ambiante en cas d’expédition du jour au lendemain

Procédure d’utilisation de la solution de stabilisation d’ARN RNAlater
Le tissu disséqué (moins de 0,5 cm dans toutes ses dimensions) est simplement immergé dans approximativement cinq volumes de solution RNAlater à température ambiante. La solution pénètre dans les cellules, stabilisant l’ARN. L’échantillon peut alors être conservé indéfiniment à -20°C (le tissu ne gèle pas), à 4°C jusqu’à un mois ou à 25°C jusqu’à une semaine Pour isoler l’ARN, le tissu est simplement retiré de la solution RNAlater et traité comme s’il venait juste d’être prélevé. La plupart des tissus peuvent être transférés directement à un tampon de lyse et homogénéisés. Les échantillons traités avec la solution RNAlater et congelés par la suite peuvent être broyés avec un mortier et un pilon ou décongelés et traités comme des tissus frais sans se soucier des ruptures de cellules et de la libération d’ARNases puisque les ARNases ont déjà été inactivées. Les cellules peuvent être extraites, puis ajoutées au tampon de lyse ou, dans certains cas, la solution RNAlater peut être ajoutée avec les cellules directement au tampon de lyse.

Compatible avec diverses procédures
La solution de stabilisation de l’ARNlater RNAest compatible avec les méthodes d’isolement d’ARN en une étape telles que le réactif TRIzol ; avec des méthodes de liaison en verre telles que Qiagen’s RNeasy ou le kit Ambion RNAqueous ; avec des méthodes d’extraction acide phénol telles que le kit Ambion ToTALLY RNA ; et avec des méthodes qui utilisent la sélection oligo(dT) de l’ARNm, telles que le kit Ambion Poly(A)Purist. La recherche en interne, ainsi que les publications récentes de la recherche indépendante, indiquent que l’utilisation de la solution de stabilisation de l’ARN RNAlater pour la conservation des tissus n’affecte pas le résultat des expériences d’analyse d’expression d’ARN ultérieures par comparaison aux autres méthodes de traitement.