Invitrogen™ Annexin V Ready Flow Conjugates for Apoptosis Detection

Les conjugués d’annexine V constituent une méthode de détection rapide et fiable pour l’étude de l’externalisation de la phosphatidylsérine, un indicateur des étapes intermédiaires de l’apoptose. La différence d’intensité de fluorescence entre les cellules apoptotiques et non apoptotiques colorées avec nos conjugués d’annexine V fluorescents, mesurés par cytométrie en flux, est généralement 100 fois supérieure environ.

Les conjugués d’Annexine V Ready Flow sont fournis en tant que colorants pour cellule apoptotique prêts à l’emploi et pouvant directement être échantillonnés. Il suffit d’ajouter une goutte du flacon compte-gouttes directement dans 1 x 106 de cellules dans un milieu de culture cellulaire contenant 5 mM de Ca2+ ou dans un tampon de liaison à l’annexine (n° de réf. V13246 ou BMS500BB), incubez et analysez. Le protocole de coloration à l’annexine traditionnel peut être utilisé comme méthode alternative en remplaçant l’ajout de 5 μl du conjugué d’annexine par l’ajout d’1 goutte du flacon compte-gouttes Ready Flow.

Le conjugué à l’annexine V Alexa Fluor 488 est excitable à 495 nm avec un pic d’émission à 519 nm.
Le conjugué à l’annexine V Alexa Fluor 647 est excitable à 650 nm avec un pic d’émission à 665 nm.
Le conjugué d’annexine V APC est excitable à 650 nm avec un pic d’émission à 660 nm.
Le conjugué d’annexine V Pacific Blue est excitable à 410 nm avec un pic d’émission à 455 nm.
La coloration à l’annexine V pour détecter les cellules apoptotiques ne peut être effectuée que sur des cellules vivantes et des tissus. Si les échantillons doivent être fixés après coloration, des conditions spécifiques sont nécessaires pour obtenir une rétention transitoire du signal. Il s’agit notamment d’utiliser une méthode de fixation sans alcool et à base d’aldéhyde, d’utiliser des tampons contenant du Ca2+ et d’éviter des surfactants/détergents. Pour vous vous faciliter la tâche, nous proposons également un tampon de liaison à l’annexine concentrée qui facilite la liaison de l’annexine V à la phosphatidylsérine dans les dosages d’apoptose.