Invitrogen™ Kit de prolifération cellulaire CellTrace™ CFSE pour cytométrie en flux

Le kit de prolifération cellulaire CellTrace™ CFSE est utilisé pour le marquage in vitro et in vivo des cellules afin de tracer plusieurs générations à l’aide de la dilution de colorants par cytométrie en flux.

• Performances supérieures—la coloration vive à pic simple permet de visualiser plusieurs générations
• Stabilité du signal à long terme—bien retenu dans les cellules pendant plusieurs jours après la coloration
• Non toxique—la coloration n’a pas d’effet nocif sur la santé des cellules
• Protocole de coloration simple et robuste

Coloration fluorescente supérieure
Une analyse de prolifération par dilution de colorant réussie (voir la figure ci-dessous) nécessite un colorant extrêmement brillant pour distinguer les cellules marquées par fluorescence des cellules auto-fluorescentes suite à plusieurs divisions cellulaires. La coloration fluorescente intense procurée par les colorants CellTrace™ CFSE permet la visualisation de huit générations ou plus de cellules proliférant avant que le signal soit submergé par l’auto-fluorescence intrinsèque des cellules. Le colorant uniforme et homogène entraîne très peu de variation de fluorescence entre les cellules d’une population, de sorte que des générations distinctes peuvent être observées sans nécessiter l’utilisation d’un logiciel complexe de modélisation.

Rétention du signal à long terme
Contrairement aux colorants qui marquent la membrane lipidique des cellules, le colorant CellTrace™ CFSE traverse facilement la membrane du plasma et se lie de façon covalente à l’intérieur des cellules où le colorant fluorescent, bien retenu et stable, est conçu pour donner un signal constant, même après plusieurs jours dans un environnement de culture cellulaire.

Non toxique
Le colorant CellTrace™ CFSE se lie de façon covalente à toutes les amines libres à la surface et à l’intérieur des cellules et montre peu de cytotoxicité, avec un effet minimal observé sur la capacité de prolifération ou sur la biologie des cellules. Les chercheurs utilisent le marquage CFSE SE pour mettre en évidence que les cellules hématopoïétiques transplantables prolifèrent in vitro par réaction à une stimulation par un cocktail de facteurs de croissance.

Protocole de coloration simple et robuste
Le kit de prolifération cellulaire CellTrace™ contient des flacons de colorant sec jetables pratiques pour permettre de réaliser des expériences à petite échelle sans préparer des quantités excessives de colorant. Une solution de réserve est préparée en dissolvant le contenu d’un flacon dans du diméthylsulfoxyde (DMSO) anhydre avant l’utilisation. Pour colorer 1 ml de cellules dans un milieu de culture exempt de protéines, il suffit en général d’utiliser 1 μl de cette solution de réserve. Les cellules doivent être colorées pendant 20 minutes à température ambiante en agitant doucement. Un bref lavage avec le milieu complet arrêtera ensuite tout colorant restant dans la solution.

Reportez-vous au manuel d’utilisation pour obtenir des instructions concernant la solubilité.