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Molecular Probes™ Kit de dosage de synthèse des protéines Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488
Description
Le kit de dosage de synthèse de protéines Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 fournit une méthode rapide, sensible et non radioactive pour la détection de la synthèse des protéines à l’aide de la microscopie par fluorescence ou de l’imagerie à haut contenu. Dans ce dosage, l’O-propargyl-puromycine (OPP) est efficacement incorporé aux protéines nouvellement transformées dans des milieux complets contenant de la méthionine et marqué par fluorescence à l’aide d’un colorant Alexa Fluor™ brillant et photostable lors d’une réaction à clic léger rapide et hautement spécifique.
Caractéristiques du kit :
Aucun changement de milieu nécessaire : les travaux sont effectués dans un milieu complet contenant de la méthionine ; il n’est pas nécessaire de supprimer le milieu cellulaire
Multiplexage : la technologie Click-iT™ Plus conserve le signal de GFP et la liaison des phalloïdines conjuguées par fluorescence
Non radioactif : une méthode alternative à la méthionine 35S, une technique traditionnelle
Utilisation in vivo : les résultats publiés ont démontré que cette technique peut être utilisée in vivo pour déterminer la traduction des protéines
Le kit contient de l’O-propargyl-puromycine (OPP), un analogue à l’alcyne de la puromycine (également disponible séparément), ainsi que de l’azoture de picolyle Alexa Fluor™ 488 et tous les réactifs nécessaires pour effectuer une réaction « clic ». L’OPP se nourrit de cellules cultivées. Il est incorporé dans des protéines pendant la protéosynthèse active. L’addition de l’azoture de picolyle Alexa Fluor™ 488 et des réactifs de réaction « clic » provoque une ligature chimiosélective, ou réaction « clic », entre le colorant à l’azoture de picolyle et l’alcyne OPP qui permet de détecter les protéines modifiées à l’aide d’une analyse basée sur des images.
La réaction clic utilise des groupes bioorthogonaux (biologiquement uniques) pour marquer de manière fluorescente les cellules en cours de prolifération, permettant de produire un faible bruit de fond et une sensibilité de détection très élevée. Grâce aux conditions de réaction douces, les dosages Click-iT™ Plus détectent les événements de traduction des protéines tout en permettant la préservation de la morphologie cellulaire, la liaison de la phalloïdine marquée par fluorescence et l’émission du signal fluorescent provenant de la GFP.
Contrairement à la méthionine 35S utilisée dans les méthodes traditionnelles, l’OPP n’est pas un analogue d’acides aminés. Il peut donc être ajouté directement aux cellules dans un milieu complet ou utilisé pour déterminer la protéosynthèse in vivo.
Le kit contient tous les composants nécessaires au marquage et à la détection de l’OPP incorporé dans les protéines nouvellement transformées dans des échantillons de cellules adhérentes. Le kit contient suffisamment de réactifs pour marquer 25 lamelles de 18 mm × 18 mm en utilisant 1 ml de tampon de réaction par test.
Caractéristiques du kit :
Le kit contient de l’O-propargyl-puromycine (OPP), un analogue à l’alcyne de la puromycine (également disponible séparément), ainsi que de l’azoture de picolyle Alexa Fluor™ 488 et tous les réactifs nécessaires pour effectuer une réaction « clic ». L’OPP se nourrit de cellules cultivées. Il est incorporé dans des protéines pendant la protéosynthèse active. L’addition de l’azoture de picolyle Alexa Fluor™ 488 et des réactifs de réaction « clic » provoque une ligature chimiosélective, ou réaction « clic », entre le colorant à l’azoture de picolyle et l’alcyne OPP qui permet de détecter les protéines modifiées à l’aide d’une analyse basée sur des images.
La réaction clic utilise des groupes bioorthogonaux (biologiquement uniques) pour marquer de manière fluorescente les cellules en cours de prolifération, permettant de produire un faible bruit de fond et une sensibilité de détection très élevée. Grâce aux conditions de réaction douces, les dosages Click-iT™ Plus détectent les événements de traduction des protéines tout en permettant la préservation de la morphologie cellulaire, la liaison de la phalloïdine marquée par fluorescence et l’émission du signal fluorescent provenant de la GFP.
Contrairement à la méthionine 35S utilisée dans les méthodes traditionnelles, l’OPP n’est pas un analogue d’acides aminés. Il peut donc être ajouté directement aux cellules dans un milieu complet ou utilisé pour déterminer la protéosynthèse in vivo.
Le kit contient tous les composants nécessaires au marquage et à la détection de l’OPP incorporé dans les protéines nouvellement transformées dans des échantillons de cellules adhérentes. Le kit contient suffisamment de réactifs pour marquer 25 lamelles de 18 mm × 18 mm en utilisant 1 ml de tampon de réaction par test.
Spécification
Spécification
| Concept écologique | Moins de risques |
| Type de produit | Kits de dosage de protéosynthèse |
| Quantité | 1 kit |
| Contenu et stockage | Ce kit contient : Réactif Click-iT™ OPP, colorant Alexa Fluor™ à l’azide de picolyle, tampon de réaction Click-iT™ OPP, protection contre le cuivre, additif pour tampon de réaction Click-iT™, tampon de réaction Click-iT™ et colorant bleu NuclearMask™ |
| Type de réactif | Réactif pour le marquage des protéines naissantes |
| Gamme de produits | Click-iT |
| Marqueur ou colorant | Alexa Fluor 488 |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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