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Invitrogen™ CloneMiner™ II cDNA Library Construction Kit

Code produit 10727625
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Quantité:
1 kit
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Code produit 10727625 Fournisseur Invitrogen™ Code fournisseur A11180

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Kit II de construction de bibliothèques d’ADNc CloneMiner™

Le kit de construction de bibliothèques d’ADNc CloneMiner™ II est un kit CloneMiner™ de deuxième génération qui permet la construction rapide de bibliothèques d’ADNc hautement représentatives sans clonage d’enzymes de restriction. Cette technologie innovante de construction de bibliothèques associe la transcriptase inverse SuperScript™ III à la technologie de clonage Gateway™, permettant la découverte de clones pleine longueur, qui étaient auparavant impossibles à obtenir. Le kit permet également d’éviter l’utilisation de réactions de ligature fastidieuses et inefficaces, ce qui rend la construction de bibliothèques plus rapide et offre une meilleure représentation.

Le kit de construction de bibliothèques d’ADNc CloneMiner™ II garantit :
  • Titres primaires élevés
  • Tailles moyennes des inserts élevées
  • Le pourcentage le plus élevé de gènes pleine longueur
  • Clonage très efficace de l’ADNc vers plusieurs vecteurs de destination sans nécessiter de digestion et de ligature par enzymes de restriction

    Fonctionnement du kit CloneMiner™ II :

  • Rendements élevés d’ADNc pleine longueur : Le kit CloneMiner™ II contient SuperScript™ III pour générer des rendements élevés d’ADNc. La transcriptase inverse (RT) SuperScript™ III, un mutant exclusif de la RT SuperScript™ II, est active à 50°C et a une demi-vie de 220 minutes. Elle a également une mutation ponctuelle qui réduit l’activité de la RNase H, diminuant ainsi la dégradation de l’ARN pendant la synthèse du premier brin et augmentant le pourcentage de gènes de pleine longueur.

  • La technologie de clonage Gateway™ évite le clonage d’enzymes de restriction : La construction de la bibliothèque est médiée par la technologie Gateway™, un système de recombinaison spécifique au site qui élimine l’utilisation d’enzymes de restriction et de ligase dans le clonage. Chaque insert d’ADNc est flanqué par des sites spécifiques de recombinaison att (ajoutés pendant les étapes de synthèse de l’ADNc) qui se recombinent avec des sites att complémentaires présents dans les vecteurs de donneur Gateway™ pour créer des clones d’entrée. Les clones d’entrée sont ensuite recombinés avec les vecteurs d’expression Gateway™ pour créer des clones d’expression, remplaçant ainsi efficacement l’utilisation d’enzymes de restriction et de ligase. Les clones résultants maintiennent le cadre d’orientation et de lecture original permettant l’analyse fonctionnelle des gènes de pleine longueur et des bibliothèques entières.

    En quoi ce kit est-il différent du kit CloneMiner™ d’origine ?
  • Le nouveau kit intègre un protocole simplifié.
  • Pour garantir des rendements élevés d’ADNc, la transcriptase inverse (RT) SuperScript™ II a été remplacée par la transcriptase inverse SuperScript™ III.
  • Pour permettre la configuration de la réaction avec moins d’étapes de pipetage, le mélange enzymatique Gateway™ BP Clonase™ a été remplacé par le mélange enzymatique Gateway™ BP Clonase™ II, qui contient des enzymes et un tampon dans un mélange unique.
  • TRUSTED_SUSTAINABILITY

    Spécification

    Type de produit Kit de préparation de bibliothèques
    Contenu et stockage Le kit CloneMiner™ II comprend la RT SuperScript™ III, des vecteurs Gateway™, des réactifs pour la construction de bibliothèques d’ADNc et des cellules compétentes résistantes aux phages T1 ElectroMax™ DH10B™. Veuillez consulter le manuel pour plus de détails. Stockez les cellules compétentes résistantes au phage T1 ElectroMax™ DH10B™ à –80°C, les colonnes de fractionnement de taille d’ADNc à +4°C et tous les autres composants du kit à –20°C.
    Souche bactérienne ou de levures DH10B
    Méthode de clonage Passerelle
    Type de produit final Bibliothèque d’ADNc
    Transcriptase inverse SuperScript™ III
    Vecteur pDONR222
    Format Kit
    Gamme de produits CloneMiner
    À utiliser avec (application) Bibliothèques d’ADNc et construction de bibliothèques d’ADNc
    Quantité 1 kit
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    Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

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