Invitrogen™ Dosage de cytotoxicité de la LDH CyQUANT™, fluorescence

Le kit de test de cytotoxicité CyQUANT™ LDH est un dosage colorimétrique qui fournit une méthode simple et fiable pour déterminer la cytotoxicité cellulaire. La lactate déshydrogénase (LDH) est une enzyme cytosolique présente dans de nombreux types de cellules différents. Elle est libérée dans les milieux de culture cellulaire après avoir endommagé la membrane plasmique. Le kit de dosage de cytotoxicité de la LDH CyQUANT fournit les réactifs pour mesurer précisément et quantitativement cette LDH extracellulaire.

Les fonctionnalités du kit de dosage de cytotoxicité de la LDH CyQUANT™ comprennent :

• Pratique—format de test add-mix-read pour les cellules adhérentes et en suspension, y compris les modèles de cellules 3D
• Précis—fournit une mesure quantitative de la libération de LDH
• Flexible—idéal pour le criblage à haut débit, surveillez la cytotoxicité du même échantillon au fil du temps
• Fiable—utilise une activité enzymatique LDH stable comme marqueur cytotoxique

La LDH est une enzyme cytosolique présente dans de nombreux types de cellules différents. C’est un indicateur de toxicité cellulaire fiable et bien établi. L’altération de la membrane plasmique entraîne une libération de la LDH dans les milieux de culture cellulaire environnants. Cette LDH extracellulaire peut être quantifiée par une réaction enzymatique couplée pendant laquelle la LDH catalyse la conversion du lactate en pyruvate via la réduction du NAD+ en NADH. La diaphorase utilise ensuite le NADH pour réduire un sel de tétrazolium (INT) en un produit formazan rouge qui peut être mesuré à 490 nm. La formation du formazan est directement proportionnelle à la quantité de LDH sécrétée dans les milieux.

Le kit de dosage de cytotoxicité de la LDH CyQUANT™ fournit les réactifs nécessaires à la quantification colorimétrique simple et fiable de la cytotoxicité cellulaire. Le kit peut être utilisé avec différents types de cellules, y compris des modèles cellulaires 3D, pour mesurer la cytotoxicité médiée par des composés chimiques ainsi que la cytotoxicité à médiation cellulaire. Étant donné que la LDH dans les milieux est l’indicateur de cytotoxicité cellulaire, le dosage peut être utilisé pour surveiller la cytotoxicité à partir du même échantillon au fil du temps. Pour effectuer le dosage, une aliquote issue des milieux de culture cellulaire est transférée sur une nouvelle plaque et le mélange de réaction est ajouté. Après une incubation de 30 minutes, la réaction est arrêtée en ajoutant une solution d’arrêt et l’absorbance est mesurée à l’aide d’un lecteur de microplaques.