Thermo Scientific™ BpiI (BbsI) (10 U/μl)

5'...G A A G A C (N)₂▵...3'

3'...C T T C T G (N)₆▵...5'

Conditions pour une activité à 100 % :

• Tampon G 1X
• Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 37°C), MgCl₂ 10 mM, NaCl 50 mM et BSA 0,1 mg/ml
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• BpiI est fournie sous la forme suivante :
• Tris-HCl 10 mM (pH 7,4 à 25°C), KCl100 mM, DTT 1 mM, EDTA 1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Ligature et reclivage :

• Après une digestion en excès de 50 fois avec Bpil, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• Dcm : ne se chevauche jamais — aucun effet
• CpG : possibilité de chevauchement ; aucun effet
• EcoKI : ne se chevauche jamais ; aucun effet
• EcoBI : possibilité de chevauchement — effet non déterminé

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :

• Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour une digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures

Remarque :

BpiI clive en aval de son site de reconnaissance et peut générer n’importe quelle saillie de 5’ de base 4 souhaité. Cette fonctionnalité est utile pour le clonage direct de produits de PCR.