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Description
Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.
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3'...T G G C C▵A...5'
Conditions pour une activité à 100 % :
- Tampon O 1X : Tris-HCl 50 mM (pH 7,5 à 37°C), MgCl2 10 mM, NaCl 100 mM et BSA 0,1 mg/ml
- Laissez incuber à 37°C
Tampon de stockage :
- BshTI est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,4 à 25°C), KCl 100 mM, DTT 1 mM, EDTA 1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)
Ligature et reclivage :
- Après une digestion en excès de 50 fois avec BshTI, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés
Effets de méthylation :
- Dam : ne se chevauche jamais ; aucun effet
- Dcm : ne se chevauche jamais — aucun effet
- CpG : se chevauche complètement ; blocage
- EcoKI : possibilité de chevauchement ; effet non déterminé
- EcoBI : possibilité de chevauchement — effet non déterminé
Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :
- Au moins 20 unités de l’enzyme sont nécessaires pour une digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures
Remarque :
Une faible concentration en sels, une forte concentration en glycérol (> 5 %), un pH > 8,0 ou un large excès d’enzyme peut induire une activité Star.
Spécification
Spécification
| Concentration | 10 U/μl |
| Sensibilité à la méthylation | Sensible à la méthylation CpG, non sensible à la méthylation dam, non sensible à la méthylation dcm, non sensible à la méthylation dam, non sensible à la méthylation dcm |
| Enzymes | BshTI (AgeI) |
| Tampon compatible | Tampon 10X O |
| Sensible à l’inactivation thermique | Oui |
| Température de réaction optimale | 37°C |
| Enzymes de restriction de type IIS | Non |
| Quantité | 200 U |
| Type de produit | Enzyme de restriction |
| Catégorie de recherche | Clonage traditionnel |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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