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Description
ADN pJET1/fragments Sdal avec site de reconnaissance Pacl inséré et digéré avec Pacl, agarose à 1 %, 2 sites de clivage
Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.
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3'...A T▵T A A T T...5'
Conditions pour une activité à 100 % :
- Tampon PacI 1X : Bis-Tris Propane-HCl 10 mM (pH 6,5 à 37°C), MgCl2 10 mM et BSA 0,1 mg/ml
- Laissez incuber à 37°C
Tampon de stockage :
- PacI est fournie dans : Phosphate de potassium 10 mM (pH 7,5 à 25°C), NaCl 200 mM, DTT 1 mM, EDTA 1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)
Ligature et reclivage :
- Après une digestion en excès de 50 fois avec PacI, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et plus de 95 % de ceux-ci peuvent être recoupés
Effets de méthylation :
- Dam : ne se chevauche jamais —aucun effet
- v
- CpG : ne se chevauche jamais —aucun effet
- EcoKI : possibilité de chevauchement ; effet non déterminé
- EcoBI : ne se chevauche jamais —aucun effet
Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :
- Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour une digestion complète, en 16 heures, de 1 μg d’ADN pJET1 intégré à de l’agarose et dans lequel a été insérée la séquence de reconnaissance PacI
Extrémités compatibles :
- BstKTI, SfaNI (AsiSI), PvuI
Spécification
Spécification
| Concentration | 10 U/μl |
| Sensibilité à la méthylation | Non sensible à la méthylation dam, non sensible à la méthylation dcm, non sensible à la méthylation CpG, non sensible à la méthylation dcm, non sensible à la méthylation CpG |
| Enzymes | PacI |
| Tampon compatible | Tampon unique (tampon 10X Paci) |
| Sensible à l’inactivation thermique | Oui |
| Température de réaction optimale | 37°C |
| Enzymes de restriction de type IIS | Non |
| Quantité | 250 U |
| Type de produit | Enzyme de restriction |
| Catégorie de recherche | Clonage traditionnel |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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