Thermo Scientific™ Nucléase S1 (100 U/μl)

• Source : Aspergillus oryzae
• Poids moléculaire : Monomère 29 kDa

• L’absence d’activité de nucléase spécifique à l’ADN double brin contaminant confirmée par un test de qualité approprié
• Testé de manière fonctionnelle pour la génération de délétions unidirectionnelles dans des fragments d’ADN (en conjonction avec l’exonucléase III)

• Aspergillus oryzae

• Monomère 29 kDa

• Une unité d’enzyme produit 1 μg de déoxyribonucléotides soluble dans l’acide en 1 min à 37°C.
• L’activité enzymatique est dosée dans le mélange suivant : Acétate de sodium 30 mM (pH 4,5), NaCl 50 mM, ZnCl₂ 0,1 mM, glycérol 5 % (v/v), ADN de thymus de veau dénaturé par chaleur 800 μg/ml

• L’enzyme est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 20 mM (pH 7,5), NaCl 50 mM, ZnCl₂ 0,1 mM et glycérol 50 % (v/v)

• Acétate de sodium 200 mM (pH 4,5 à 25°C), NaCl 1,5 M et ZnSO₄ 10 mM

• Inhibiteurs : chélateurs métalliques, PP_i, P_i, 5’-ribonucléotides et désoxyribonucléotides
• Inactivation par chauffage à 70°C pendant 10 min en présence d’EDTA

Recommandé dans les cas suivants :

Élimination de saillies simple brin de fragments d’ADN (2) ; cartographie des transcripts S1 (3, 4) ; clivage des boucles en épingle à cheveux ; création de délétions unidirectionnelles des fragments d’ADN en conjonction avec l’exonucléase III (5)

Remarque :

La nucléase S1 peut provoquer des cassures de l’ADN double brin, de l’ARN double brin et des hybrides ADN/ARN en cas de concentration élevée d’enzymes et de faible concentration en sel (6).