Invitrogen™ GeneArt™ Gibson Assembly HiFi Cloning Kit, electrocompetent cells

Le kit de clonage HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson permet l’assemblage et le clonage d’ADN via une technique qui permet de lier de manière transparente plusieurs fragments d’ADN qui se chevauchent dans le cadre d’une réaction isotherme à une seule étape, de 15 à 60 minutes. Les fragments d’ADN de différentes longueurs sont assemblés uniformément à l’aide de chevauchements complémentaires entre les fragments. Grâce à sa flexibilité inhérente, cette approche convient aux constructions d’ADN de petite et grande taille et comprend des inserts simples et multiples. Les produits résultants peuvent être utilisés pour un certain nombre d’applications en aval, notamment la transformation, la PCR et l’amplification en cercle roulant (RCA). Le kit de clonage HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson, cellules électrocompétentes, est un kit complet qui inclut un master Mix, une cellule témoin positive, de l’eau et des bactéries E. coli ElectroMAX DH10B électrocompétentes.

Caractéristiques du kit de clonage HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson :

• Simple—assemblez et clonez jusqu’à six fragments d’ADN en une seule réaction
• Efficace—la haute fidélité offre des clones plus corrects que les autres méthodes
• Flexible—une conception qui permet un assemblage dans n’importe quel vecteur de votre choix
• Pratique—disponible sous forme de kits de Master Mix et de kits de clonage complets avec des cellules chimiques ou électrocompétentes
• Fiable—plus de 4000 citations dans la littérature scientifique soulignant sa grande efficacité

Assemblage parfait de plusieurs maximum

Le kit de clonage HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson est un processus en une seule étape grâce auquel jusqu’à six fragments sont combinés dans un mélange enzymatique exclusif pour assembler des fragments d’ADN avec une homologie des extrémités terminales partagée sans séquences supplémentaires ou cicatrices (transparent). Après une incubation de 15–60 minutes, une portion de la réaction d’assemblage est ensuite transformée en cellules chimiquement compétentes ou électrocompétentes, afin d’obtenir des clones prêts à être analysés le jour suivant. L’homologie des extrémités terminales de 20 à 40 paires de base requise est conçue dans le fragment de novo pour la synthèse ou peut être facilement conçue par amplification PCR avec des oligos d’ADN personnalisés. Ce mélange enzymatique spécial crée une construction d’ADN homogène et liée par covalence qui offre une grande efficacité.

Une méthode robuste pour une efficacité maximale

En raison du produit final lié par covalence, la méthode HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson permet l’utilisation de cellules chimiquement compétentes ou de cellules électrocompétentes pour une efficacité de transformation optimale, qui permet de trouver plus efficacement le clone adéquat, plus particulièrement pour les constructions plus difficiles. Il n’est pas nécessaire d’utiliser des enzymes de restriction, une ligature ou des sites de recombinaison et la méthode garantit une construction parfaitement transparente sans bases supplémentaires indésirables.

Offre une grande polyvalence

La méthode HiFi de l’assemblage GeneArt Gibson garantit la polyvalence, permet de simplifier de nombreuses techniques grâce à la combinaison, l’ajout, la suppression ou l’échange rapide de segments d’ADN et élimine la nécessité de sous-cloner, ce qui permet de gagner du temps et des efforts dans le flux de travail lié au clonage.