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Invitrogen™ BLOCK-iT™ U6 RNAi Entry Vector Kit
Description
Includes
Le kit de vecteur d’entrée BLOCK-iT™ U6 contient deux boîtes. La boîte de clonage contient quatre tubes de vecteur linéarisé à 5 ng/tube, suffisamment pour compléter 5 réactions de clonage par tube. Sont également inclus unμtampon de recuit de 250 L 10X, uneμligase d'ADN de 20 L T4, unμtampon de ligase d'ADN de 80 L 5X, un oligo de contrôle de 1,4 ng lac Z, unμ plasmide de contrôle de 10 L lyophilisé de lac Z, une eau exempte de DNase/RNase de 1,5 ml et μdeux g d'amorces de séquençage avant et arrière.
Un processus de clonage facile place un ADN oligonucléotide d'environ 50 bp immédiatement après un promoteur de type U6 pol III. L'expression de cette cassette RNAi forme une molécule d'ARNm dans la cellule qui sera traitée et servira d'ARN interférant court (siARN) qui générera l'effet RNAi.
Livraison de la cassette U6 RNAi
Une fois le clonage terminé, le vecteur d'entrée U6 est prêt à être utilisé immédiatement dans des transfections transitoires à l'aide d'un réactif tel que Lipofectamine™ 2000. Ce système est donc idéal pour les criblures initiales d'ARNm dans de nombreux types de cellules de mammifères. Comme alternative dans les types de cellules difficiles à transfecter ou non à diviser, ou pour livrer aux systèmes de modèles animaux, la cassette RNAi peut facilement être recombinée en un vecteur RNAi viral BLOCK-iT. Pour une distribution et une expression de lentivirale stable de l'ARNshN, recombinez le vecteur d'entrée BLOCK-iT U6 avec le vecteur RNAi Plenti6/BLOCK-iT. Pour une livraison transitoires à des types de cellules difficiles à l'aide d'une transduction adénovirale, recombinez avec le vecteur RNAi pad/BLOCK-iT. Représente une technique privilégiée pour l'analyse de la régulation du gène vers le bas.
clonage, clonage Gateway, RNAi, ARNi, recherche sur l’épigénétique et l’ARN non codant, ARNi vectoriel
Spécification
Spécification
| Type de produit | Kit de vecteur d’entrée RNAi |
| Contenu et stockage | Le kit de vecteur d’entrée BLOCK-iT™ U6 contient deux boîtes. La boîte de clonage contient quatre tubes de vecteur linéarisé à 5 ng/tube, suffisamment pour compléter 5 réactions de clonage par tube. Sont également inclus 250 µl de tampon de recuit 10X, 20 µl de ligase d'ADN T4, 80 µl de tampon de ligase d'ADN 5X, 1,4 ng d'oligo de contrôle de lac Z, 10 µl de plasmide de contrôle de lac Z lyophilisé, 1,5 ml d'eau exempte de DNase/RNase et 2 µg d'amorces de séquençage avant et arrière. Stockez les vecteurs, les tampons, les oligo-éléments de contrôle et les amorces de plasmide, d'eau et de séquençage à -20°C. ™ La boîte One Shot contient des réactifs de transformation comprenant vingt-et-unµaliquotes de 50 l de One Shot™ TOP10 chimiquement compétentes E. coli, S.O.C. et un plasmide de contrôle superenroulé pUC19. Conservation à -80°C. La stabilité de tous les réactifs est garantie pendant 6 mois, sous réserve d’une bonne conservation. |
| Méthode de clonage | Gateway™ |
| Système constitutif ou inductible | Vecteurs |
| Type de livraison | Transfection |
| Type d’ARNi | ARNsh |
| Vecteur | Vecteurs BLOCK-iT RNAi |
| Accélérateur | U6 |
| Format | Kit |
| Gamme de produits | BLOCK-iT |
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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