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Invitrogen™ Système de synthèse premier brin SuperScript™ III
Description
Includes
50 μl d’Oligo(dT)20 (50 μM) ; 250 μl d’hexamères aléatoires (50 ng / μl) ; 1 ml de tampon 10X RT ; 250 μl de DTT 0,1 M ; 500 μl de chlorure de magnésium 25 mM ; 250 μl de mélange dNTP 10 mM ; 50 μl de RT SuperScript III (200 U / μl) ; 100 μl d’ARNaseOUT (40 U / μl) ; 50 μl d’E. coli Rnase H (2 U / μl) ; 1,2 ml d’eau traitée au DEPC ; 20 μl d’ARN total HeLa (10 ng / μl) ; 25 μl d’amorce de contrôle sens (10 μM) ; 25 μl d’amorce de contrôle antisens (10 μM)
Ce système permet de détecter les cibles d’ARN de 100 bp à >12 kb. La quantité de produit de départ peut aller de 1 pg à 5 μg d’ARN total. La transcriptase inverse SuperScript III est une version de RT M-MLV conçue pour réduire l’activité RNase H et procurer une meilleure stabilité thermique Cette enzyme peut être utilisée pour synthétiser de l’ADNc à des températures allant de 42 à 55°C, offrant une meilleure spécificité, des rendements d’ADNc supérieurs et davantage de produit de pleine longueur que d’autres transcriptases inverses. Dans la mesure où la RT SuperScript III n’est pas inhibée sensiblement par l’ARN ribosomique et l’ARN de transfert, elle peut être utilisée pour synthétiser de l’ADNc premier brin à partir d’une préparation d’ARN total.
- Utilisation du système de synthèse premier brin SuperScript III : la synthèse d’ADNc est effectuée dans un premier temps avec de l’ARN total ou de l’ARN sélectionné par poly(A)+ amorcé avec de l’oligo(dT), des amorces aléatoires ou une amorce génétique.
- Dans un deuxième temps, la PCR est effectuée dans un tube distinct à l’aide d’amorces propres au gène d’intérêt
- Pour la réaction de PCR, nous recommandons l’une des ADN polymérases suivantes :
- L’ADN polymérase Platinum Taq offre des conditions de démarrage à chaud automatiques pour une meilleure spécificité jusqu’à 4 kb
- L’ADN polymérase Platinum Taq haute-fidélité offre un rendement accru et une haute-fidélité pour les cibles jusqu’à 15 kb
- L’ADN polymérase Platinum Pfx offre une fidélité maximale pour les cibles jusqu’à 12 kb
- Température de réaction optimale : 50°C
- Suffisant pour 50 réactions, sur la base d’une taille de réaction de 20 μl
PCR & PCR en temps réel, transcription inverse
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Glace carbonique
Spécification
Spécification
| Contenu et stockage | • Oligo(dT)20, 50 μl (50 μM) |
| Format | Kit |
| GC-Rich PCR Performance | Élevé |
| Vitesse de réaction | 50 min |
| Technique | Transcription inverse |
| Température de réaction optimale | 50°C |
| Quantité | 50 rxns |
| Transcriptase inverse | SuperScript III |
| Conditions d’expédition | Glace carbonique |
| À utiliser avec (application) | Analyse par biopuces, RT-PCR |
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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