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Invitrogen™ Système de synthèse premier brin SuperScript™ III

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Description

Includes

50 μl d’Oligo(dT)20 (50 μM) ; 250 μl d’hexamères aléatoires (50 ng / μl) ; 1 ml de tampon 10X RT ; 250 μl de DTT 0,1 M ; 500 μl de chlorure de magnésium 25 mM ; 250 μl de mélange dNTP 10 mM ; 50 μl de RT SuperScript III (200 U / μl) ; 100 μl d’ARNaseOUT (40 U / μl) ; 50 μl d’E. coli Rnase H (2 U / μl) ; 1,2 ml d’eau traitée au DEPC ; 20 μl d’ARN total HeLa (10 ng / μl) ; 25 μl d’amorce de contrôle sens (10 μM) ; 25 μl d’amorce de contrôle antisens (10 μM)

Optimisé pour la synthèse d’ADNc premier brin à partir de poly(A)+ purifié, d’ARN total ou de RT-PCR.

The SuperScript III First-Strand Synthesis System for RT-PCR is optimized to synthesize first-strand cDNA from purified poly(A)+ or total RNA. RNA targets from 100 bp to >12 kb can be detected with this system and the amount of starting material can vary from 1 pg to 5 μg of total RNA. SuperScript III Reverse Transcriptase is a version of M-MLV RT that has been engineered to reduce RNase H activity and provide increased thermal stability. The enzyme is used to synthesize cDNA at a temperature range of 42–55°C, providing increased specificity, higher yields of cDNA, and more full-length product than other reverse transcriptases. Because SuperScript III RT is not significantly inhibited by ribosomal and transfer RNA, it may be used to synthesize first-strand cDNA from a total RNA preparation.

Le système de synthèse premier brin SuperScript™ III pour la RT-PCR est optimisé pour synthétiser l’ADNc premier brin à partir de poly(A)+ purifié ou d’ARN total. Ce système permet de détecter les cibles d’ARN de 100 bp à >12 kb. La quantité de produit de départ peut aller de 1 pg à 5 µg d’ARN total. La transcriptase inverse SuperScript™ III est une version de RT M-MLV conçue pour réduire l’activité RNAse H et procurer une meilleure stabilité thermique Cette enzyme peut être utilisée pour synthétiser de l’ADNc à des températures allant de 42 à 55°C, offrant une meilleure spécificité, des rendements d’ADNc supérieurs et davantage de produit de pleine longueur que d’autres transcriptases inverses. Comme la RT SuperScript™ III n’est pas significativement inhibée par l’ARN ribosomal et de transfert, elle peut être utilisée pour synthétiser l’ADNc premier brin à partir d’une préparation d’ARN total.

Utilisation du système SuperScript™ III premier brin
La synthèse d’ADNc est effectuée dans un premier temps avec de l’ARN total ou de l’ARN sélectionné par poly(A)+ amorcé avec de l’oligo(dT), des amorces aléatoires ou une amorce génétique. Dans un deuxième temps, la PCR est effectuée dans un tube distinct à l’aide d’amorces propres au gène d’intérêt. Pour la réaction de PCR, nous recommandons l’un des ADN polymérases suivants : L’ADN polymérase Platinum™ Taq offre des conditions d’activation à chaud automatique pour une spécificité accrue allant jusqu’à 4 kb, l’ADN polymérase Platinum™ Taq haute-fidélité offre un rendement accru et une haute fidélité pour des cibles allant jusqu’à 15 kb, et l’ADN polymérase Platinum™ Pfx offre une fidélité maximale pour des cibles allant jusqu’à 12 kb.

Informations sur la commande

Conditions d’expédition : Glace carbonique

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Spécification

Contenu et stockage

• Oligo(dT)20, 50 μl (50 μM)
• Hexamères aléatoires, 250 μl (50 ng/μl)
• Tampon RT 10X, 1 ml
• DTT, 250 μl (0,1 M)
• Chlorure de magnesium, 500 μl (25 mM)
• Mélange de dNTP, 250 μl (10 mM)
• RT SuperScript III, 50 μl (200 U/μl)
• RNaseOUT, 100 μl (40 U/μl)
• RNase H d’E. coli, 50 μl (2 U/μl)
• Eau traitée au DEPC, 1,2 ml
• ARN total HeLa, 20 μl (10 ng/μl)
• Amorce de contrôle sens, 25 μl (10 μM)
• Amorce de contrôle antisens, 25 μl (10 μM)

Conserver à –20°C.
Format Kit
GC-Rich PCR Performance Élevé
Vitesse de réaction 50 min
Technique Transcription inverse
Température de réaction optimale 50°C
Quantité 50 rxns
Transcriptase inverse SuperScript III
Conditions d’expédition Glace carbonique
À utiliser avec (application) Analyse par biopuces, RT-PCR
Type de produit final ADNc premier brin
Nbre de réactions 50 réactions
Format de réaction Composants séparés
Type de réactif Transcription inverse
Matériau de départ ARN
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.

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