Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector, without competent cells

Les promoteurs T7 et Sp6 du vecteur pCR II permettent une transcription in vitro de l’insert en vue de générer des produits de type sens et antisens. Le kit TA Cloning Dual Promoter s’appuie sur le vecteur de clonage pCRII et la ligase d’ADN ExpressLink T4 de façon à générer, à température ambiante et en quinze minutes, un produit de ligature. Les réactions permettent généralement d’obtenir > 80 % de produits recombinants comportant des inserts.

• Rapide et pratique : 15 minutes, ligature à température ambiante
• Efficacité : analyse des bleus / blancs et > 80 % de clones avec insert correct
• Flexibilité : résistance à la kanamycine ou à l’ampicilline, offrant ainsi le choix de l’antibiotique souhaité
• Simplicité : élimination de toute modification enzymatique du produit PCR
• Simplification : aucune amorce de PCR associée à des sites de restriction nécessaire
• Saillies 3’-T pour la ligature directe de produits PCR amplifiés par Taq
• Accélérateurs de T7 et Sp6 pour la transcription et le séquençage in vitro de l’ARN
• Lieur multisite flexible avec sites EcoR I de flanquement pour faciliter l’excision des inserts
• Sites d’amorce M13 directs et inversés pour le séquençage
• Méthode de clonage : Enzyme de restriction / MCS

• Fonctionnement du TA Cloning
• L’activité dissociée de tout modèle de la polymérase Taq confère une désoxyadénosine (A) unique aux extrémités 3’ des produits de PCR.
• Le vecteur linéarisé fourni dans ce kit comporte des résidus de désoxythymidine 3’ (T) simple.
• Ceci permet aux inserts de PCR de se ligaturer de façon efficace avec le vecteur.
• Configurations du kit
• Le kit TA Cloning est proposé dans différentes configurations : avec des cellules chimiquement compétentes INVF’ E. coli One Shot (K2050-01 et K2050-40), des cellules chimiquement compétentes TOP10F’ E. coli One Shot (K2060-01 et K2060-40), et sans des cellules chimiquement compétentes (K2750-20 et K2750-40), dans des configurations à 20 ou 40 réactions.

Clonage, clonage par PCR