Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli

Le kit TA Cloning™ s’appuie sur le vecteur de clonage pCR™2.1 et la ligase d’ADN ExpressLink™ T4 de façon à générer à température ambiante et en quinze minutes un produit de ligature. Les réactions permettent généralement d’obtenir > 80 % de produits recombinants comportant des inserts.

• Rapide et pratique : 15 minutes, ligature à température ambiante
• Efficacité : analyse des bleus / blancs et > 80 % de clones avec insert correct
• Flexibilité : résistance à la kanamycine ou à l’ampicilline, offrant ainsi le choix de l’antibiotique souhaité
• Facilité : élimination de toute modification enzymatique des produits de PCR
• Simplification : aucune amorce de PCR associée à des sites de restriction nécessaire

Le vecteur pCR™2.1 met à votre disposition :

• Saillies 3′-T pour la ligature directe des produits de PCR amplifiés par Taq
• Accélérateur de T7 pour la transcription et le séquençage in vitro de l’ARN
• Lieur multisite flexible avec sites EcoR I de flanquement pour faciliter l’excision des inserts
• Sites d’amorce M13 directs et inversés pour le séquençage

Fonctionnement du TA Cloning™
L’activité dissociée de tout modèle de la polymérase Taq confère une désoxyadénosine (A) unique à l’extrémité 3′ des produits de PCR. Le vecteur linéarisé fourni dans ce kit comporte des résidus de déoxythymidine 3′ (T) simple. Ceci permet aux inserts de PCR de se ligaturer de façon efficace avec le vecteur.

Autres configurations du kit
Le kit TA cloning™ est également proposés sans cellules compétentes (K2020-20, K2020-40), avec des cellules E. coli chimiquement compétentes One Shot™ INVF (K2000-01, K2000-40) ou avec des cellules E. coli chimiquement compétentes One Shot™ TOP10F (K2030-01, K2030-40).