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Invitrogen™ TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli
Description
Le kit TA Cloning™ s’appuie sur le vecteur de clonage pCR™2.1 et la ligase d’ADN ExpressLink™ T4 de façon à générer à température ambiante et en quinze minutes un produit de ligature. Les réactions permettent généralement d’obtenir > 80 % de produits recombinants comportant des inserts.
- Rapide et pratique : 15 minutes, ligature à température ambiante
- Efficacité : analyse des bleus / blancs et > 80 % de clones avec insert correct
- Flexibilité : résistance à la kanamycine ou à l’ampicilline, offrant ainsi le choix de l’antibiotique souhaité
- Facilité : élimination de toute modification enzymatique des produits de PCR
- Simplification : aucune amorce de PCR associée à des sites de restriction nécessaire
Le vecteur pCR™2.1 met à votre disposition :
- Saillies 3′-T pour la ligature directe des produits de PCR amplifiés par Taq
- Accélérateur de T7 pour la transcription et le séquençage in vitro de l’ARN
- Lieur multisite flexible avec sites EcoR I de flanquement pour faciliter l’excision des inserts
- Sites d’amorce M13 directs et inversés pour le séquençage
Fonctionnement du TA Cloning™
L’activité dissociée de tout modèle de la polymérase Taq confère une désoxyadénosine (A) unique à l’extrémité 3′ des produits de PCR. Le vecteur linéarisé fourni dans ce kit comporte des résidus de déoxythymidine 3′ (T) simple. Ceci permet aux inserts de PCR de se ligaturer de façon efficace avec le vecteur.
Autres configurations du kit
Le kit TA cloning™ est également proposés sans cellules compétentes (K2020-20, K2020-40), avec des cellules E. coli chimiquement compétentes One Shot™ INVF (K2000-01, K2000-40) ou avec des cellules E. coli chimiquement compétentes One Shot™ TOP10F (K2030-01, K2030-40).
Spécification
Spécification
| Souche bactérienne ou de levures | TOP10 |
| Type de cellule | E. coli chimiquement compétentes |
| Méthode de clonage | TA Cloning |
| Contenu et stockage | Les kits TA Cloning™ contiennent un vecteur pCR™ 2,1 linéarisé, une ligase d’ADN ExpressLink™ T4, 5 tampons de ligature d’ADN ExpressLink™ T4, des dNTP, 10 tampons PCR, de l’eau stérile et des témoins. Les kits cellulaires compétents contiennent un milieu E. coli chimiquement compétent One Shot™, un milieu S.O.C. et un plasmide témoin superenroulé. Conserver les cellules E. coli One Shot™ à -80°C. Conserver tous les autres composants à -20°C. La stabilité de tous les réactifs est garantie pendant 6 mois, sous réserve d’une bonne conservation. |
| Format | Kit |
| À utiliser avec (application) | Clonage PCR |
| Nbre de réactions | 20 réactions |
| Gamme de produits | One Shot |
| Type de produit | Kit de clonage |
| Accélérateur | T7 |
| Afficher plus |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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