Invitrogen™ Kit TOPO™ TA Cloning™ pour séquençage, sans cellules compétentes

Description

Chaque kit utilise le vecteur pCR4-TOPO TA avec des sites d’amorce de séquençage spécifiquement conçus, qui permettent, pour chaque réaction, d’augmenter la séquence d’insert et de réduire celle de vecteur. Selon vos besoins et votre budget, ces kits peuvent comporter tout un éventail de cellules compétentes, ou aucune de ces cellules. Ces kits incluent tout ce qui est nécessaire pour cloner et sélectionner des vecteurs recombinants contenant votre fragment de PCR de choix.

Kits de clonage TOPO TA pour le séquençage : Aperçu
Vector : vecteur PCR4-TOPO TA : vecteur de clonage optimisé pour des résultats de séquençage améliorés
Méthode de clonage : TOPO™ TA Cloning™: Topoisomérase I, ligature en 5 minutes des produits PCR avec saillies de 3’A (amplification Taq) sur le vecteur
Cellules compétentes : Choix de kits : kits généraux, hautement efficaces, à cellules résistantes au T1 bactériophages, ou à cellules compétentes à fort taux de croissance, ou kits propres à vos applications
Vecteur TA pCR4-TOPO : Optimisé pour le séquençage
Nous avons éliminé la majeure partie du site de clonage multiple du vecteur TA pCR4- TOPO pour raccourcir la distance entre les sites d’amorce de séquençage et le site d’insertion à une valeur aussi faible que 33 bp. Résultat : les réactions de séquençage diminuent la séquence de vecteur et augmentent celle de l’insertion. Le vecteur TA pCR4-TOPO comprend des sites pour 4 amorces de séquençage communes : M13 direct, M13 inverse, T7 et T3. Les kits incluent une aliquote de chaque.
Sélection et manipulation de clones TA PCR4-TOPO
Le vecteur TA pCR4-TOPO contient à la fois des marqueurs de résistance à l’ampicilline et à la kanamycine et une fusion de gènes LacZα-ccdB pour une sélection positive et une sélection bleu/blanc. Le site de clonage multiple minimisé du vecteur inclut toujours des sites EcoRI de flanquement pour l’excision simplifiée des produits de PCR clonés et un site Sse8387I unique pour la génération des suppressions imbriquées avant le séquençage. Les promoteurs T7 et T3 sont également présents pour la transcription in vitro.
Clonage simplifié basé sur TOPO
Grâce à la technologie de clonage TOPO, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces pour PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de la transformer avec les cellules compétentes E. coli fournies.
Clonage efficace
Avec jusqu’à 95 % de clones porteurs de l’insert désiré, vous n’avez plus besoin d’analyser autant de clones, ce qui vous permet de gagner du temps et de l’argent. Le vecteur pCR4-TOPO TA utilisé dans ce kit est livré avec des surpendus 3'T pour une ligature efficace des produits PCR amplifiés par Taq, qui contiennent des surpendus 3'A.
La norme en matière de clonage
En matière de clonage, la technologie de clonage TOPO est un partenaire fiable depuis plus de dix ans pour des milliers de scientifiques. Rapide, simple à utiliser et efficace, le clonage TOPO a été appliqué à de nombreux vecteurs différents pour un large éventail d'applications.
Kits de clonage TOPO TA pour le séquençage : options de kit
Le kit de clonage TOPO TA pour le séquençage peut être acheté avec une variété de cellules compétentes offrant différents avantages en fonction de vos besoins :

• Clonage général : TOP10 (No de catalogue K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Clonage haute efficacité : Cellules ™ TOP10 Electrocomp (No de catalogue K4580-01, K4580-40)
• Clonage général, résistance aux bactériophages T1 : DH5α-T1R (No de catalogue K4595-01, K4595-40)
• Croissance rapide : Mach1™-T1R chimiquement compétente E. Coli (No de catalogue K4530-20)
• Fournissez le vôtre : pour plus de souplesse et économiser de l’argent (No de catalogue 450030)

Une version du kit qui inclut un kit de minipréparation d’ADN plasmidique rapide PureLink™ (No de catalogue K4575-02) à utiliser pour l’isolement de plasmide recombinant propre et prêt pour le séquençage est également disponible.

• Résistance à l'ampicilline (AmpR) et à la kanamycine (KanR)
• Obtenez plus de séquence : permet d’augmenter la séquence d’insert et de réduire la séquence de vecteur lors de l’utilisation d’amorces de séquençage standard
• Rapide et simple : seulement trois étapes, réalisées en cinq minutes à peine, séparent le clonage de la PCR
• Efficace : obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
• Résultats prouvés : performances fiables pendant plus d’une décennie avec plus de 4 000 citations

Clonage, clonage par PCR

Informations sur la commande

Conditions d’expédition : Glace carbonique