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Invitrogen™ Kit de clonage par PCR Zero Blunt™, sans cellules compétentes
Description
Includes
Les kits de clonage par PCR Zero Blunt™ contiennent : un vecteur PCR™-Blunt linéarisé, une ligase d’ADN ExpressLink™ T4, un tampon de ligase d’ADN 5X ExpressLink™ T4, un modèle de contrôle, des dNTPs, eau stérile et des amorces M13 avant et antisens. Les kits cellulaires compétents contiennent un milieu E. coli chimiquement compétent One Shot™, un milieu S.O.C. et un plasmide témoin superenroulé.
Le kit de clonage de PCR Zero Blunt™ s’appuie sur le vecteur de clonage multifonctions PCR™-Blunt et la ligase d’ADN ExpressLink™ T4 de façon à générer à température ambiante et en cinq minutes un produit de ligature.
Le vecteur PCR-Blunt fournit :
- Sites EcoR I encadrant le site d’insertion du produit de PCR, pour une excision des inserts
- Site promoteur/amorce T7 pour la transcription et le séquençage de l’ARN in vitro
- Sites d’amorce sens et antisens M13 pour le séquençage ou l’analyse PCR
Le kit de clonage de PCR Zero Blunt a été conçu pour cloner des fragments de PCR aux extrémités franches (ou tout fragment d’ADN aux extrémités franches) avec un faible fond de non recombinants. Le vecteur PCR-Blunt contient le gène létal E. coliccdB fusionné à l’extrémité carboxylique du fragment LacZα (Bernard et al., 1994). La ligature d’un fragment de PCR aux extrémités franches perturbe l’expression du gène de fusion lacZα-ccdB, permettant seulement la croissance des recombinants positifs après transformation. Les cellules contenant un vecteur non-recombinant sont tuées lorsque le mélange de transformation est plaqué.
Configurations du kit
Le kit de clonage de PCR Zero Blunt est disponible dans plusieurs configurations : avec les cellules chimiquement compétentes One Shot™ TOPO10 E. coli (K2700-20 et K2700-40) et sans les cellules chimiquement compétentes (K2750-20 et K2750-40) dans des configurations de kits à 20 ou 40 réactions.
- Rapide et pratique : 5 minutes, ligature à température ambiante
- Efficacité : le gène ccdB comme sélecteur positif permet d’obtenir >80 % de clones avec le bon insert
- Flexible : résistance à la kanamycine ou à la Zeocin™, offrant ainsi le choix de l’antibiotique souhaité
Clonage, clonage par PCR
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Glace carbonique
Spécification
Spécification
| Souche bactérienne ou de levures | Non inclus |
| Méthode de clonage | Blunt PCR |
| Contenu et stockage | Les kits de clonage par PCR Zero Blunt™ contiennent : un vecteur PCR™-Blunt linéarisé, une ligase d’ADN T4 ExpressLink™, 5X tampons de ligase d’ADN T4 ExpressLink™, un modèle de contrôle, des dNTPs, de l’eau stérile et des amorces directes et inverses M13. Conserver tous les composants à -20°C. La stabilité de tous les réactifs est garantie pendant 6 mois, sous réserve d’une bonne conservation. |
| Format | Kit |
| Gamme de produits | TOPO™, Zero Blunt™ |
| Type de produit | Kits de clonage PCR |
| Accélérateur | T7 |
| Quantité | 20 réactions |
| Vecteur | Vecteurs de clonage d’ADN Blunt |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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