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Invitrogen™ Kit de clonage PCR Zero Blunt™ TOPO™, avec cellules E. coli TOP10 chimiquement compétentes One Shot™
Description
Includes
Vecteur pCR™Blunt II-TOPO™ linéarisé et topoisomérase I-activé ; solution saline ; dNTP ; modèle de contrôle ; amorces M13 avant et arrière ; eau stérile ; milieu One Shot™ chimiquement compétent ou E. coli Electrocomp™ ; milieu S.O.C. ; plasmide de contrôle pUC19 superenroulé
- Chaque kit contient le vecteur Zero Blunt™ TOPO™ qui possède le gène ccdB comme sélecteur positif, autorisant seulement la croissance des vecteurs plasmide avec recombinants.
- Disponible avec une variété de cellules compétentes, ou sans cellules compétentes
- Rapide et facile — passez de la PCR aux clones en seulement 3 étapes, dont une réaction de clonage de 5 minutes
- Efficace — obtenez jusqu’à 95 % de clones avec le bon insert
- Éprouvé — offrent des performances fiables depuis plus d’une décennie avec plus de 20 000 citations
- Simple — aucune ligase, procédure post-PCR ou amorce PCR contenant des séquences spécifiques n’est requise
- Précision — pour une utilisation avec des polymérases d’ADN haute fidélité, pas besoin de dépassement A sur le produit PCR
- Le vecteur pCR™ Blunt II-TOPO™ permet de cloner les produits de PCR à extrémités franches et générés par les polymérases thermostables à activité corrective comme l’ADN polymérase Platinum™ Pfx.
- Il permet de sélectionner directement les recombinants grâce à la rupture du gène E. coli, ccdB létal. Le vecteur contient le gène ccdB fusionné à l’extrémité carboxylique du fragment LacZα. La ligature d’un produit de PCR à extrémités franches perturbe l’expression du gène de fusion LacZα-ccdB, permettant seulement la croissance des recombinants positifs après transformation. Les cellules contenant des vecteurs non recombinants sont éliminées durant l’étalement. Le screening bleu ou blanc n’est donc pas nécessaire.
- Grâce à la technologie de clonage TOPO™, il n’est pas nécessaire d’utiliser des amorces PCR contenant des séquences spécifiques ou des procédures post-PCR, de préparer les vecteurs ni d’effectuer d’autres étapes de manipulation longues d’ADN. Il suffit d’ajouter votre réaction PCR directement dans le vecteur chargé en topoisomérase, d’incuber pendant 5 minutes et de transformer les cellules compétentes E. coli.
- Les kits de clonage par PCR Zero Blunt™ TOPO™, pour l’insertion directe des produits de PCR à extrémités franches dans un vecteur de plasmide, peut s’acheter avec une variété de cellules compétentes qui offrent différents avantages
Informations sur la commande
Conditions d’expédition : Glace carbonique
Spécification
Spécification
| Souche bactérienne ou de levures | TOP10 |
| Type de cellule | Chimiquement compétent |
| Méthode de clonage | Blunt TOPO™ |
| Contenu et stockage | Boîte 1 : •Vecteur PCR™ Blunt II-TOPO™ linéarisé et activé par topoisomérase I • Solution saline • dNTP • Modèle de contrôle • Amorces directes et inverses M13 • Eau stérile Stockez entre -5 et -30°C. Tous les réactifs sont stables pendant 6 mois lorsqu’ils sont correctement stockés. Boîte 2 : • Cellules d’E. coli chimiquement compétentes One Shot™ ou Electrocomp™ • Milieu S.O.C. • Plasmide de contrôle pUC19 superenroulé Stockez entre -68 et -85°C. |
| Format | Kit |
| Gamme de produits | One Shot |
| Type de produit | Kits de clonage PCR |
| Accélérateur | SP6 |
| Quantité | 25 réactions |
| Vecteur | Vecteurs de clonage d’ADN Blunt |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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