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Description
Le fragment de Klenow, exo-, est le long fragment de l’ADN polymérase I. Il présente une activité polymérase 5'→ 3', sans les activités exonucléase 3'→ 5' et 5'→ 3' de l’ADN Polymerase I. L’activité exonucléase 3'→ 5' de l’enzyme est éliminée par des mutations du site de l’activité exonucléase 3'→ 5'.
Points clés
- Sans activité exonucléase 3’ → 5’
- Incorpore des nucléotides modifiés (p. ex., nucléotides avec marquage à la Cy3, à la Cy5, à la fluorescéine, à la rhodamine, à l’aminoallyl, à la biotine)
- Active dans les tampons d’enzymes de restriction, de PCR et de RT
Applications
- Marquage aléatoire de l’ADN
- Marquage par remplissage en saillies de 5’ d’ADN double brin
- Amplification par déplacement de séquence (SDA)
- Séquençage de l’ADN avec la méthode Sanger
Remarque
Le fragment de Klenow, exo-, n’est pas recommandé pour les réactions de troncature de l’ADN avant une ligature de l’ADN, car il ajoute souvent au moins un nucléotide supplémentaire à l’extrémité 3’ des substrats d’ADN à extrémités tronquées indépendamment de la matrice
Spécification
Spécification
| Concentration | 5 U / μl |
| Polymérase | ADN polymérase I |
| Tampon compatible | Enzyme de restriction, PCR, tampon RT |
| Quantité | 300 U |
| Type de produit | Fragment Klenow |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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