Thermo Scientific™ Kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR

Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Thermo Scientific Maxima pour RT-qPCR en temps réel est un système pratique optimisé pour la synthèse d’ADNc dans les applications de PCR quantitative en temps réel (qPCR en temps réel) en 2 étapes. Le kit utilise la transcriptase inverse (RT) Maxima, une enzyme avancée dérivée par évolution in vitro de la RT M-MuLV. L’enzyme présente une grande thermostabilité, une robustesse et un taux de synthèse d’ADNc plus élevé par rapport à la RT M-MuLV de type sauvage.
Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR est capable de synthétiser de l’ADNc reproductible à partir d’une large gamme de quantités d’ARN total (1 pg à 5 μg) à des températures élevées (42 à 65°C). La réaction de synthèse peut s’effectuer en 15 à 30 minutes. Les composants du kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima pour la RT-qPCR sont prémélangés afin de gagner du temps et de réduire le risque d’erreurs de pipetage.
Le nouveau kit de synthèse de l’ADNc premier brin Maxima avec dbDNase simplifie considérablement le flux de travail qui réunit, dans une procédure à un tube, élimination de l’ADN génomique et synthèse de l’ADNc. Le kit contient une nouvelle DNase spécifique double brin (DNasedb) conçue pour éliminer l’ADN génomique contaminant des préparations d’ARN en 2 minutes sans nuire à la qualité ou à la quantité d’ARN. Une activité hautement spécifique vers l’ADN double brin garantit que l’ADN simple brin (comme l’ADNc et les amorces) n’est pas clivé et que l’ARN traité par DNasedb peut être directement ajouté à la transcription inverse.

Points clés

• Étape d’élimination intégrée de l’ADNg
• Rendements élevés d’ADNc pleine longueur jusqu’à 20 kb.
• Synthèse d’ADNc efficace à températures élevées comprises entre 42 et 65°C.
• Taux de synthèse amélioré : synthèse d’ADNc complète en 15 à 30 minutes.
• Sensibilité et spécificité élevées

Applications

• RT-PCR en 2 étapes
• RT-qPCR en 2 étapes

Comprend
Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima pour RT-qPCR contient

• Mélange enzymatique Maxima (transcriptase inverse Maxima et inhibiteur d’ARNase RiboLock)
• Mélange 5 X Reaction Mix (tampon de réaction, dNTPs, oligo (dT)₁₈ et amorces hexamères aléatoires)
• Eau exempte de nucléase

Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima avec DNasedb contient

• Mélange enzymatique Maxima (transcriptase inverse Maxima et inhibiteur d’ARNase RiboLock)
• Mélange 5 X Reaction Mix (tampon de réaction, dNTPs, oligo (dT)18 et amorces hexamères aléatoires)
• DNasedb
  • Tampon DNasedb 10X
• Eau exempte de nucléase

Informations supplémentaires relatives aux composants de la réaction
L’inhibiteur d’ARNase RiboLock recombinant fourni avec le mélange enzymatique Maxima protège efficacement les modèles d’ARN de la dégradation par les RNases A, B et C à des températures jusqu’à 55°C.

L’oligo(dT)₁₈ et les amorces hexamères aléatoires sont fournis avec le kit. Les amorces hexamères aléatoires se lient de façon non spécifique et sont utilisées pour synthétiser l’ADNc à partir de tous les ARN d’une population d’ARN totaux. L’amorce oligo(dT)₁₈ se fixe sélectivement à l’extrémité 3’ de l’ARN poly(A), synthétisant uniquement l’ADNc des ARNm poly(A). Les amorces spécifiques aux gènes peuvent également être utilisées avec le kit pour amorcer la synthèse à partir d’une séquence spécifiée.

L’eau exempte de nucléase est fournie pour la préparation et la dilution des échantillons d’ARN. L’absence d’endo-, d’exodésoxyribonucléases, de ribonucléases et de phosphatases a été confirmée par des tests de qualité appropriés.

Kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima Universal
Uniquement disponible aux États-Unis et au Canada

Le kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima Universal diffère du kit de synthèse d’ADNc premier brin Maxima car il dispose de composants de kit séparés : transcriptase inverse Maxima, inhibiteur d’ARNase RiboLock, tampon RT 5X, dNTP 10 mM, amorce oligo (dT)18, amorce hexamère aléatoire et eau sans nucléase.

Danger : Non
Contrôle qualité :

• Testé fonctionnellement dans la RT-qPCR en deux étapes en utilisant différentes quantités de départ (5 ng à 0,5 fg) de transcription d’ARN dans les réactions de transcription inverse suivies d’une amplification avec le mélange qPCR Maxima SYBR Green / ROX Master Mix.
• L’efficacité est comprise dans la plage de 90 à 110 %, la pente est comprise entre -3,09 et -3,58 avec un coefficient de corrélation de > 0,99.

Conditions d’expédition : Glace carbonique
Conditions de conservation : − 20°C