Sartorius™ Microsart™ ATMP Mycoplasma

La détection rapide de la contamination par les mycoplasmes dans les médicaments de thérapie innovante (MTI) est très importante. Le Microsart™ ATMP Mycoplasma permet de réduire le temps de test de plusieurs semaines à seulement trois heures. En outre, la sonde TaqMan™ ajoute une grande spécificité au système PCR et minimise l’interprétation des résultats. Le Microsart™ ATMP Mycoplasma a été validé efficacement selon la Ph. Eur. 2.6.7 en combinaison avec la Ph. Eur. 2.6.21 en ce qui concerne la limite de détection pour toutes les espèces de mycoplasmes répertoriées, la spécificité et la robustesse pour les transplantations de cellules autologues (par exemple, les chondrocytes).

Des applications efficaces contre les mycoplasmes sont présentes dans la plupart des installations de culture cellulaire et des laboratoires de culture tissulaire. On estime que les mycoplasmes sont responsables de près de 60 % de la contamination des cultures cellulaires. Le kit PCR en temps réel Microsart™ ATMP Mycoplasma est spécialement conçu pour les hôpitaux, les établissements et les entreprises qui testent la contamination par mycoplasmes conformément à la Ph. Eur. 2.6.21 dans les thérapies cellulaires. Il peut être utilisé pour détecter directement les mollicutes (mycoplasmes, acholeplasmes, spiroplasmes) dans les cultures cellulaires et les produits biologiques dérivés des cultures cellulaires, MTI.

Les mycoplasmes à haute performance sont détectés explicitement par l’amplification d’un opéron d’ARNr hautement conservé ou, plus précisément, d’une région codante de l’ARNr 16S dans le génome des mycoplasmes. L’amplification spécifique des mycoplasmes est détectée à 520 nm (canal FAM™). Le kit comprend un Master Mix prêt à l’emploi contenant de la polymérase, des amorces et des sondes marquées FAM™ et ROX™, qui permet la détection spécifique des espèces de mollicutes, ainsi qu’un contrôle interne. Une limite de détection inférieure à 10 CFU/ml pour toutes les espèces de mycoplasmes mentionnées dans la pharmacopée européenne répond à ses exigences en matière de sensibilité, de spécificité et de robustesse.

Prévention de la contamination Le kit contient du dUTP au lieu du dTTP, afin de dégrader les amplicons des analyses précédentes à l’aide de l’uracil-ADN glycosylase (UNG). Ainsi, l’apparition de résultats faussement positifs peut être minimisée. L’UNG n’est pas incluse dans le kit. Le contrôle interne d’amplification détecte les résultats faussement négatifs dus à des inhibiteurs de la PCR ou à une extraction incorrecte de l’ADN. L’ADN de contrôle interne peut être ajouté directement au Master Mix PCR pour servir de contrôle PCR ou surveiller le processus d’extraction. L’amplification du contrôle interne est détectée à 610 nm (canal ROX™). En utilisant l’uracile-ADN glycosylase (UNG), le kit contient du dUTP au lieu du dTTP pour dégrader les amplicons de l’analyse précédente avec l’uracile-ADN glycosylase (UNG). Cela minimise l’apparition de résultats faussement positifs.