Macherey-Nagel™ Cadre MN pour une manipulation optimisée des plaques à 96 puits

Le NucleoSpin 8/96 RNA pour la purification automatisée de l'ARN total à partir de cultures de cellules animales ou humaines et de tissus combine la rigueur de la lyse au guanidine-isothiocyanate avec une digestion efficace de l'ADN génomique par traitement à la DNase I et la rapidité de la technologie des membranes de silice. NucleoSpin 8/96 RNA garantit une qualité d'ARN constante, des rendements d'ARN reproductibles et des procédures à haut débit exemptes de contamination croisée. Par conséquent, les kits NucleoSpin 8/96 RNA sont des produits puissants pour, par exemple, l'analyse de microarrays en ce qui concerne le profilage de l'expression génique, la découverte de médicaments et les diagnostics moléculaires (voir les données d'application). Les kits permettent la purification de l'ARN total à partir de jusqu'à ^10⁷ cellules ou jusqu'à 30 mg de tissu (traitement par centrifugation). La conception unique en bande de 8 puits/plaque de 96 puits des systèmes NucleoSpin 8/96 ARN permet le séchage entièrement automatisé du module de liaison de l'ARN avant le chargement du tampon d'élution et minimise les pulvérisations. Avec la méthode NucleoSpin 8/96 ARN, les cellules ou les tissus sont lysés par incubation dans une solution contenant de grandes quantités d'ions chaotropes (les cellules peuvent être cultivées et lysées directement dans des plaques de culture cellulaire à 96 puits). Ce tampon de lyse inactive immédiatement les RNases et crée des conditions de liaison appropriées qui favorisent l'adsorption de l'ARN sur la membrane de silice de la bande de liaison à l'ARN NucleoSpin 8/plaque de liaison à l'ARN 96. L'ADN contaminant, également lié à la membrane de silice, est éliminé par la DNase I qui est appliquée directement sur la membrane lors de la préparation (la DNase I est fournie avec les kits). Grâce à la forte activité spécifique de la DNase I, un traitement de seulement 15 minutes à température ambiante suffit pour une élimination efficace de l'ADN contaminant. Les sels, métabolites et composants cellulaires macromoléculaires sont éliminés par des étapes de lavage simples à l’aide de trois tampons différents. L'ARN pur est finalement élué dans des conditions de faible force ionique avec de l'eau sans RNase (pH 8,0 à 8,5).

Composants du kit :
Kit NucleoSpin 8 ARN : barrettes de liaison ARN NucleoSpin, plaques de lavage MN, blocs à puits carrés MN, supports avec barrettes de tubes, barrettes de bouchons, plaques d’élution à fond en U, film auto-adhésif, tampons, DNase I sans RNase. Kit NucleoSpin 96 ARN : plaques de liaison ARN NucleoSpin, plaques de lavage MN, blocs à puits carrés, bloc à puits ronds (faible concentration), plaques d’élution à fond en U, film auto-adhésif, tampons, DNase I sans RNase.

Isolement manuel ou automatisé de l'ARN total à partir de cellules et de tissus en culture, d'échantillons de salive prélevés avec Oragene .