Invitrogen™ DAF-FM Diacetate (4-Amino-5-Methylamino-2',7'-Difluorofluorescein Diacetate)

Il est essentiellement non fluorescent jusqu’à ce qu’il réagisse avec le NO pour former un benzotriazole fluorescent. La fluorescence du DAF-FM peut être détectée par tous les instruments capables de détecter la fluorescéine, notamment les cytomètres en flux, les microscopes, les lecteurs de microplaques fluorescentes et les fluoromètres.

• Ex / Em de DAF-FM : environ 495 / 515 nm
• Le produit lyophilisé doit être dissous à l’aide de DMSO, puis ajouté à un tampon aqueux afin de créer une solution de travail
• Le diacétate du DAF-FM est perméant aux cellules et se diffuse passivement à travers les membranes cellulaires ; une fois à l’intérieur des cellules, il est converti en une forme imperméante aux cellules
• Les tampons contenant de l’albumine sérique bovine (BSA) et du rouge de phénol peuvent affecter la fluorescence et doivent être utilisés avec précaution
• Le rendement quantique de fluorescence du DAF-FM est d’environ 0,005 mais il s’amplifie d’environ 160 fois pour atteindre ∼ 0,81 après réaction avec le NO
• Évaluation de la production de NO dans les lymphoblastes carencés en transaldolase par cytométrie en flux
• Détection de l’accumulation de NO dans les neurones corticaux embryonnaires suite à une stimulation par des neutrophines
• Imageriein vivo du NO chez les poissons zèbres

• Détection microscopique intravitale de la production de NO associée à l’angiogenèse chez les souris
• Quantification de la sécrétion de NO induite par l’ATP dans les plaquettes de lapin
• À un pH supérieur à 5,5, les spectres de l’adduit de NO du DAF-FM sont indépendants du pH.
• L’adduit de NO du DAF-FM est considérablement plus photostable que celui du DAF-2, ce qui signifie davantage de temps pour la capture des images.
• Le DAF-FM est un réactif plus sensible au NO que le DAF-2 (la limite de détection du NO avec le DAF-FM est d’environ 3 nM contre environ 5 nM avec le DAF-2).

Reportez-vous au manuel Molecular Probes™ pour obtenir plus d’informations sur les produits.

Analyse cellulaire, métabolisme cellulaire, viabilité cellulaire, prolifération et fonction, recherche sur l’oxyde nitrique, stress nitro-oxydant