Thermo Scientific™ NcoI (10 U/μL)

5'...C▵C A T G G...3'

3'...G G T A C▵C...5'

Conditions pour une activité à 100 % :

• Tampon Tango 1X : Tris-acétate 33 mM (pH 7,9 à 37°C), Mg-acétate 10 mM, acétate 66 mM et BSA 0,1 mg/ml
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• NcoI est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 10 mM (pH 7,5 à 25°C), KCl 50 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)

Ligature et reclivage :

• Après une digestion en excès de 50 fois avec Ncol, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais —aucun effet
• v
• CpG : ne se chevauche jamais —aucun effet
• EcoKI : ne se chevauche jamais —aucun effet
• EcoBI : ne se chevauche jamais —aucun effet

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :

• Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour une digestion complète d’1 μg d’ADN Lambda intégré à de l’agarose en 16 heures

Extrémités compatibles :

• AflIII, PscI, BtgI, Eco130I, FatI, PagI

Remarque :

Une faible concentration en sels, une forte concentration en glycérol (> 5 %), un pH > 8,0 ou un large excès d’enzyme peut induire une activité Star.