Thermo Scientific™ NcoI (10 U/μl)

5’...C▵C A T G G...3’

3’...G G T A C▵C...5’

Conditions pour une activité de 100 % :

• Tampon 1X Tango : 33 mM de Tris-acétate (pH 7,9 à 37°C), 10 mM de Mg-acétate, 66 mM de K-acétate et 0,1 mg/ml de BSA
• Laissez incuber à 37°C

Tampon de stockage :

• NcoI est fourni en : 10 mM de Tris-HCl (pH 7,5 à 25°C), 50 mM de KCl, 1 mM de DTT, 0,1 mM d’EDTA, 0,2 mg/ml de BSA et 50 % (v/v) de glycérol

Ligature et clivage :

• Après une surdigestion 50 fois supérieure avec NcoI, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés.

Effets de méthylation :

• Dam : ne se chevauche jamais aucun effet.Dam : ne se chevauche jamais aucun effet.
• Dcm : ne se chevauche jamais — aucun effet.
• CpG : ne se chevauche jamais — aucun effet.
• EcoKI : ne se chevauche jamais — aucun effet.
• EcoBI : ne se chevauche jamais — aucun effet.

Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :

• Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour une digestion complète de 1 μg d’ADN lambda incorporé à l’agarose en 16 heures.

Extrémités compatibles :

• AflIII, PscI, BtgI, Eco130I, FatI, PagI

Remarque :

Une faible concentration en sels, une forte concentration en glycérol (>5 %), un pH >8,0 ou un large excès d’enzyme peut induire une activité Star.