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Thermo Scientific™ NotI (10 U/μl)
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ADN Ad2 digéré avec Notl, 0,7 % d’agarose, 7 sites de clivage
Les endonucléases de restriction classique sont une grande collection d’enzymes de restriction de haute qualité, optimisées pour fonctionner dans l’un des tampons du système à cinq tampons. En outre, le tampon Tango universel est fourni pour des raisons de commodité dans les digestions doubles. Toutes les enzymes présentent une activité de 100 % dans le tampon et les conditions de réaction recommandés. Pour garantir une performance constante, les tampons de réaction d’enzymes de restriction Thermo Scientific contiennent de la BSA prémélangée, qui améliore la stabilité de nombreuses enzymes et lie les contaminants qui peuvent être présents dans les préparations d’ADN.
5'..G C▵G G C C G C...3'
3'..C G C C G G▵C G...5'
Conditions pour une activité à 100 % :
- Tampon O 1X : Tris-HCl 50 mM (pH 7,5 à 37°C), MgCl2 10 mM, NaCl 100 mM et BSA 0,1 mg/ml
- Laissez incuber à 37°C
Tampon de stockage :
- Notl est fournie sous la forme suivante : Tris-HCl 20 mM (pH 7,8 à 25°C), NaCl 100 mM, EDTA 0,1 mM, DTT 1 mM, Triton X-100 0,02 %, BSA 0,2 mg/ml et glycérol 50 % (v/v)
Ligature et reclivage :
- Après une digestion en excès de 50 fois avec NotI, plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés
Effets de méthylation :
- Dam : ne se chevauche jamais —aucun effet
- v
- CpG : chevauchement complet ; blocage
- EcoKI : ne se chevauche jamais —aucun effet
- EcoBI : ne se chevauche jamais —aucun effet
Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :
- Au moins 5 unités de l’enzyme sont nécessaires pour la digestion complète d’1 μg d’ADN d’adénovirus-2 intégré à de l’agarose en 16 heures
Extrémités compatibles :
- Bsp120I, CfrI, Eco52I
Remarque :
Dosé à l’aide de l’ADN plasmide pTZ19RJL2 digéré avec BseLI. Les plasmides superenroulés peuvent nécessiter jusqu’à 5 fois plus de Notl pour une digestion complète que les ADN linéaires.
Spécification
Spécification
| Concentration | 10 U/μl |
| Sensibilité à la méthylation | Sensible à la méthylation CpG, non sensible à la méthylation dam, non sensible à la méthylation dcm, non sensible à la méthylation dam, non sensible à la méthylation dcm |
| Enzymes | Not I |
| Tampon compatible | Tampon 10X O |
| Sensible à l’inactivation thermique | Oui |
| Température de réaction optimale | 37°C |
| Enzymes de restriction de type IIS | Non |
| Quantité | 1500 U |
| Type de produit | Enzyme de restriction |
| Catégorie de recherche | Clonage traditionnel |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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