Macherey-Nagel™ NucleoSpin™ Kit 8 puits pour la purification de l'ARN/ADN viral (8 virus).

Le kit NucleoSpin 8 Virus permet une préparation simultanée rapide d’acides nucléiques viraux à partir de sérum, plasma ou tout autre liquide biologique exempt de cellules. Les kits permettent une purification fiable de l’ARN et de l’ADN viraux sans contamination croisée. NucleoSpin 8 Virus est principalement conçu pour une utilisation manuelle dans une centrifugeuse. Les kits principaux NucleoSpin 8 Virus permettent une plus grande variation et une plus grande flexibilité dans les consommables utilisés pour la lyse, le lavage et l’élution, et ils sont principalement recommandés pour une utilisation manuelle ou automatisée sous vide. Grâce à la méthode NucleoSpin 8 Virus, les virus à ARN sont rapidement et efficacement lysés par un tampon de lyse, une solution de GITC très concentrée. Les virus à ADN (par exemple le VHB) sont généralement plus difficiles à isoler et nécessitent une digestion des échantillons avec de la protéinase K. Le tampon de lyse et l'éthanol créent des conditions appropriées pour la liaison des acides nucléiques à la membrane de silice des bandes ou plaques de liaison virale NucleoSpin. L’ARN porteur inclus dans le tampon de lyse améliore la fixation et la récupération de l’ARN / ADN viral faiblement concentré. Les contaminations (inhibiteurs potentiels de PCR) comme les sels, métabolites et composants cellulaires macromoléculaires solubles sont éliminées par des étapes de lavage avec des tampons de lavage éthanolique. Les acides nucléiques viraux purifiés peuvent être élués dans un tampon à faible teneur en sel ou dans de l’eau et sont prêts à l’emploi pour d’autres applications en aval telles que la RT-PCR ou la PCR.

Centrifugation

Pour le traitement par centrifugation des kits NucleoSpin 8 Virus, une centrifugeuse à microplaques est nécessaire, capable d'accueillir les bandes/plaques NucleoSpin Virus empilées sur un bloc ou un rack à puits ronds ou carrés avec des barrettes de tubes et atteignant des accélérations de 5 600. – 6 000 xg (hauteur du godet : 85 mm). Pour le traitement par centrifugation des bandes à 8 puits, le kit de démarrage réutilisable C, contenant des porte-colonnes C, des bandes factices, des blocs de puits carrés MN et des bandes de tubes, est nécessaire.

Traitement sous vide

Les kits de NucleoSpin 8 Virus peuvent être utilisés manuellement avec le collecteur à vide NucleoVac 96. Pour le traitement sous vide des barrettes à 8 puits, le kit de démarrage réutilisable A contenant les supports de colonne A et des barrettes factices est nécessaire. Pour l’automatisation sur les plateformes de laboratoire avec des chambres à vide pour plaque à 96 puits standard, l’utilisation du kit de démarrage A est également requise.

Composants du kit : bandes de liaison aux virus NucleoSpin, blocs à puits carrés MN, supports avec bandes de tubes, bandes de bouchons, feuille auto-adhésive, tampons, ARN porteur, protéinase K.

• Volume d'élution : 70 à 100 μL
• Récupération typique : > 90%
• Capacité de reliure : 40 μg
• Temps de préparation : 60 min / 6 bandes