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OPTIZYME™ SacI, Fisher BioReagents™
Description
5’…G A G C T^C...3’
3’…C^T C G A G...5’
Fourni avec : OPTIZYME 10X Ecl136II, tampon Sacl
Conditions pour 100 % d’activité :
- 1Tampon X OPTIZYME Ecl136II, SacI : 10 mM de bis-tris propane-HCl (pH 6,5 à 37°C), 10 mM de MgCl2 et 0,1 mg/ml de BSA
- Laissez incuber à 37°C
- Tampon 1 : 50 - 100 %
- Tampon 2 : 20 - 50 %
- Tampon 3 : 0 - 20 %
- Tampon 4 : 50 - 100 %
- Tampon 5 : 0 - 20 %
- 10mM de tris-HCl (pH 7,4 à 25°C), 100 mM de KCI, 1 mM de DTT, 1 mM d’EDTA, 0,2 mg/ml de BSA et 50 % (v/v) de glycérol
- SacI est sensible à la méthylation des cytosines dans la séquence GAGmCTC mais pas dans GAGCTmC et insensible à la méthylation de l’adénine dans la séquence GmAGCTC/. AluI méthyltransférase (AGmCT) peut être utilisé pour bloquer SacI.
- Les plasmides surenroulés peuvent nécessiter jusqu’à 5 fois plus de SacI que l’ADN linéaire pour une digestion complète.
- SacI est inhibé par les anticoagulants cliniques courants que l’on trouve dans certaines préparations de sang périphérique anticoagulé et de moelle osseuse. Les concentrations d’EDTA et d’ACD (acide citrique-citrate de sodium-dextrose) dans la préparation d’échantillons standard provoquent l’inhibition de SacI. Une concentration d’héparine 3 fois supérieure à la normale est nécessaire pour inhiber SacI.
Effets de méthylation :
Dam : Ne se chevauche jamais - aucun effet
Dcm : Ne se chevauche jamais - aucun effet
CpG : Possibilité de chevauchement - aucun effet.
- 5’…m5C GAGCTm5C G...3’
- 5’…TGm6AGCTC(N)4 TGCT...3’
Spécification
Spécification
| Concentration | 10 U/μl |
| Composants | 10X OPTIZYME™ Ecl136II, tampon SacI |
| Température de l’incubateur | 37°C |
| pH | 7,4 |
| À utiliser avec (application) | > 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une digestion excessive multipliée par 50 avec SacI |
| Tampon de stockage | 10 mM de Tris HCl (pH 7,4 à 25°C), 100 mM de KCl, 1 mM d’EDTA, 1 mM de DTT, 0,2 mg/ml de BSA, 50 % de glycérol |
| Quantité | 2000 U |
| Site de coupe | GAGCT.C |
| Type de produit | Sacl |
| Forme | Liquide |
Nom du produit
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