OPTIZYME™ XbaI, Fisher BioReagents™

5’…T^C T A G A...3’
3’…A G C^T...5’

Fourni avec : Tampon OPTIZYME 10X4
Conditions pour 100 % d’activité

• Tampon OPTIZYME 1X 4 : 33 mM de tris-acétate (pH 7,9 à 37°C), 10 mM de Mg-acétate, 66 mM de K-acétate et 0,1 mg/ml de BSA
• Laissez incuber à 37°C

Activité enzymatique dans les tampons OPTIZYME :

• Tampon 1 : 50 - 100 %
• Tampon 2 : 50 - 100 %
• Tampon 3 : 20 - 50 %
• Tampon 4 : 100 %
• Tampon 5 : 0 - 20 %

Tampon de stockage :
Tris-HCI 10 mM (pH 7,4 à 25°C), 100 mM KCI, 7 mM 2-mercaptoéthanol, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA et 50 % (v/v) glycérol
Ligature et nouveau clivage :
Plus de 95 % des fragments d’ADN peuvent être ligaturés et recoupés après une digestion excessive 50 fois avec XbaI.
Digestion de l’ADN incorporé à l’agarose :
Un minimum de 5 unités de XbaI est requis pour la digestion complète de 1 μg d’ADN lambda incorporé à l’agarose en 16 heures.
Remarques :

• Xbal est bloqué par le chevauchement avec la méthylation dam.
• Pour éviter la méthylation des barrages, utilisez une souche de dam- et de dcm-.

Extrémités compatibles : BcuI, Eco130 I, NheI, XmaJI
Effets de méthylation :
Dam : Risque de chevauchement - bloqué

• 5’…TCTAGm6A TC...3’
• 3’…AGATC Tm6AG...5’
• (Le clivage est bloqué)

Dcm : Ne se chevauche jamais - aucun effet
CpG : Ne se chevauche jamais - aucun effet
EcoKI : Ne se chevauche jamais - aucun effet
EcoBI : Ne se chevauche jamais - aucun effet