Thermo Scientific™ Mélange d’ADN polymérase et dNTP Phusion™ Hot Start II (10 mM chacun)

ADN polymérase Phusion Hot Start II haute fidélité

L’ADN polymérase Thermo Scientific™ Phusion haute fidélité représente une méthode de référence optimale pour la PCR haute performance. Grâce à un taux d’erreur 52 fois inférieur à celui de Taq et 6 fois inférieur à celui de Pfu, elle est excellente pour le clonage et d’autres applications exigeant une haute fidélité. Elle offre une performance fiable avec des délais courts de protocoles, même avec des inhibiteurs PCR. Ell produit de meilleurs rendements avec des quantités réduites d’enzymes que les autres ADN polymérases.

• Haute-fidélité (52X Taq)
• Pas d’amplification et de dégradation d’amorces non spécifiques pendant la configuration de la réaction
• PCR rapide compte tenu des délais courts d’extension (15 à 30 s / kb)
• Rendement accru du produit avec un volume minimum d’enzyme

Avec l’ADN polymérase Phusion™ Hot Start II à démarrage à chaud haute-fidélité, l’amplification se fait sans formation de produits non spécifiques grâce à la combinaison de l’ADN polymérase Phusion™ et d’un ligand Affibody spécifique, se liant de manière réversible, qui inhibe l’activité de l’ADN polymérase à température ambiante. Le ligand Affibody inhibe également l’activité exonucléase 3´ → 5´ de la polymérase, empêchant ainsi la dégradation des amorces et du modèle d’ADN durant la configuration de la réaction. Le ligand est libéré à des températures qui stimulent l’activité de la polymérase, cette dernière devenant pleinement active. L’ADN polymérase Phusion™ Hot Start II à démarrage à chaud haute fidélité est immédiatement réactivée à hautes températures, elle ne requiert donc aucune étape d’activation séparée dans les protocoles de PCR.

Utilisation d’ADN polymérases Phusion™

Les règles d’hybridation des ADN polymérases Phusion™ sont différentes de nombreuses ADN polymérases courantes (telles que les ADN polymérases Taq). Mélange de dNTP Le mélange de dNTP Thermo Scientific™ contient des solutions aqueuses pré-mélangées de dATP, dCTP, dGTP et dTTP, chacune à une concentration finale de 10 mM. Les nucléotides affichent une pureté supérieure à 99 % et sont exempts d’activités de nucléases, ainsi que d’ADN humain et d’ADN d’E. coli. Les mélanges permettent de réduire le nombre d’étapes de pipetage et le risque d’erreurs de configuration des réactions.

• Pureté supérieure à 99 % confirmée par HPLC
• Sans ADN humain et d’E. coli
• Stable après plusieurs cycles de congélation-décongélation.
• Jusqu’à 95 % de dNTP gardent la forme de triphosphate après 7 semaines à température ambiante
• Jusqu’à 90 % de dNTP gardent la forme de triphosphate après 30 cycles de PCR (1 minute à 94°C ; 3 minutes à 72°C)

À utiliser dans toutes les applications de biologie moléculaire, dont la PCR, la PCR en temps réel, la PCR haute fidélité et longue, la LAMP-PCR, la synthèse d’ADNc, la RT-PCR, la RDA, la MDA, le marquage d’ADN et le séquençage d’ADN.