Thermo Scientific™ Pierce™ Protein A IgG Plus Orientation Kit, 2 mL

Ces kits d’orientation d’IgG utilisent un agent de réticulation pour fixer par covalence l’anticorps lié à la résine d’agarose de la protéine A ou de la protéine G, créant ainsi une colonne d’affinité réutilisable pour la purification des antigènes. Les kits d’orientation Plus permettent une immobilisation des anticorps plus efficace et plus stable que la méthode d’orientation traditionnelle car ils utilisent l’agent de réticulation DSS (subérate disuccinimidyl) de l’ester NHS plutôt que l’agent de réticulation DMP (diméthyl pimelimelidate) de l’imidoester. Plusieurs milligrammes d’IgG peuvent être liés et réticulés à chaque colonne de 2 ml, puis la colonne d’affinité préparée peut être utilisée plusieurs fois pour la purification d’antigènes en utilisant des conditions de liaison et d’élution typiques.

La méthode d’immobilisation est appelée orientation car les anticorps sont d’abord capturés dans la résine d’affinité à travers leurs régions Fc, qui sont les sites de liaison cibles des ligands de protéine A et de protéine G. Ainsi, les anticorps sont liés avec leurs sites de liaison d’antigènes orientés vers l’extérieur. L’agent de réticulation DSS réagit avec les amines primaires (chaîne latérale de résidus de lysine) de la protéine A / G et l’anticorps lié par affinité, ce qui permet de fixer les protéines par covalence et de manière permanente.

Points clés :

• Purification d’antigènes sans contaminants : permet la purification d’antigènes sans contamination (co-élution) d’anticorps

• Immobilisation d’anticorps covalents et anti-fuite : liaison haute capacité de l’IgG à l’agarose de protéine A ou de protéine G, suivie d’une réticulation efficace avec l’agent de réticulation DSS

• Résine d’agarose haute qualité : agarose en microbilles réticulée à 6 %, avec la protéine A ou G recombinante

• Conditions de liaison et de réticulation douces : couplant l’anticorps dans le PBS standard

• Immobilisation orientée : lie et réticule les IgG avec les sites de liaison des antigènes dirigés vers l’extérieur, capables de capturer l’antigène passant dans la phase mobile sans encombrement stérique

• Kits complets : comprennent tous les réactifs nécessaires pour immobiliser l’anticorps

• Mieux que le DMP : moins de lixiviation d’anticorps que la méthode d’orientation traditionnelle avec l’agent de réticulation diméthyl pimelimidate

Comprend :

Colonnes de protéine A ou G, subérate de disuccinimidyl (DSS), boîte PBS, tampon de blocage, tampon de liaison / lavage, tampon d’élution et accessoires de colonne