Thermo Scientific™ Pierce™ Concentrateurs de protéines PES, seuil de coupure moléculaire de 30 kDa

Pour les protéines et autres échantillons biologiques, tels que les acides nucléiques, avec un seuil de rétention des molécules de 30 000, les concentrateurs de protéines en PES de Pierce offrent une concentration rapide des protéines, une excellente récupération des échantillons et une compatibilité avec les instruments. Ces dispositifs centrifuges sont dotés d’une membrane en polyéthersulfone (PES) à haut débit pour la concentration, le dessalage et l’échange de tampons d’échantillons biologiques. Ce produit peut être utilisé pour le traitement d'échantillons de volumes de 0,5 –à 100 mL.

Les concentrateurs de protéines PES de 30 kDa présentent les caractéristiques suivantes :
• Une concentration rapide des protéines (—de 10 à 30 fois) peut être obtenue en 15 minutes ou moins.
•Excellente récupération des protéines, récupération typique des —protéines > 90 % (lorsque la masse de l'échantillon est au moins deux fois supérieure à la limite de coupure moléculaire indiquée)
•Compatibilité avec l'instrument : —une microcentrifugeuse standard à rotor oscillant ou à angle fixe (sauf 88536) peut être utilisée ; l'échantillon peut être prélevé et récupéré sans centrifugation inversée.
•Polyvalent, il permet de réaliser —facilement la concentration d'échantillons, la diafiltration ou l'échange de tampon d'échantillons

biologiques. Pour une identification facile, la valeur MWCO est gravée sur le côté de chaque appareil. Pour faciliter l’ajout et la récupération d’échantillons, une fenêtre transparente avec graduations se trouve sur le côté de chaque dispositif permettant la détermination visuelle du volume rétentat. La conception verticale de la membrane permet des débits élevés, une faible liaison non spécifique et une agrégation protéique négligeable sur la membrane, et elle offre des résultats fiables et cohérents pour le traitement de volumes d’échantillon compris entre 0,5 et 100 ml. La récupération protéique type est de 90 %, lorsque la masse des protéines de l’échantillon est au moins deux fois supérieure à celle du seuil de rétention des molécules de l’instrument utilisé. Par exemple, lors de la concentration d'IgG (MW) ∼ Pour les échantillons de 150K, utilisez les concentrateurs MWCO de 5K, 10K, 30K ou 50K. Des concentrations finales d'échantillon de 10 à 30 fois supérieures peuvent être atteintes en 15 minutes.

Applications des concentrateurs de protéines PES
• Concentration protéique des milieux de culture tissulaire, des antisérums ou des préparations d'anticorps monoclonaux
• Concentration des pics protéiques après chromatographie d'exclusion stérique
• Élimination du marqueur non incorporé suite aux réactions de modification des protéines
• Concentration et dessalage/échange de tampon après élution de protéines à partir de colonnes de chromatographie d'échange d'ions, d'interaction hydrophobe (HIC), de chélation métallique ou d'affinité
• Séparation de molécules de tailles

différentes Les concentrateurs de protéines Pierce PES contiennent une membrane conçue pour retenir les molécules dont le poids moléculaire est au moins deux fois supérieur au seuil de coupure moléculaire (MWCO) de la membrane PES à l'intérieur du dispositif. Une récupération réduite peut avoir lieu lors de l’utilisation d’un concentrateur possédant des molécules plus petites que la masse recommandée. Le taux de récupération des protéines variera en fonction de la protéine spécifique présente dans l'échantillon et de sa concentration initiale.

Le volume mort des concentrateurs de –0,5 mL, 2,6 mL, –5,20 mL et 20,100 mL –est d'environ 15 mL.μL, 30 μL, 50 μL et 350 μL, respectivement.

Pour atteindre > Avec les concentrateurs de 0,5 mL, la récupération de protéines atteint 90 %, la concentration minimale de l'échantillon de protéines doit être de 0,05 mg/mL. Pour tous les autres concentrateurs, la concentration minimale de protéines de l'échantillon doit être de 0,1 mg/mL.

Centrifugations et vitesses optimales
Les concentrateurs de 0,5 mL peuvent être utilisés efficacement à une force centrifuge maximale de 15 000 tr/min. × g en utilisant uniquement une centrifugeuse à angle fixe.

Pour les concentrateurs de 2 à 6 mL, on peut utiliser des modèles de centrifugeuses à godets oscillants ou à angle fixe. Centrifugeuses à godets oscillants capables de générer 2 000 – 4 000 × g et une force centrifuge maximale de 4 000 × g sont recommandés. Avec des centrifugeuses à angle fixe, des modèles capables de générer 5 000 – 10 000 × g et une force centrifuge maximale de 8 000 × g sont recommandés.

Pour les concentrateurs de volume de 5 à 20 mL, on peut utiliser des modèles de centrifugeuses à godets oscillants ou à angle fixe. Centrifugeuses à godets oscillants capables de générer 2 000 – 5 000 × g et une force centrifuge maximale de 4 000 × g sont recommandés. Avec des centrifugeuses à angle fixe, des modèles capables de générer 5 000 – 8 000 × g et une force centrifuge maximale de 6 000 × g sont recommandés.

Pour les concentrateurs de 20 à 100 mL, seules les centrifugeuses à godets oscillants capables de générer 1 000 – 2 000 × g sont recommandés. Utilisez une force centrifuge maximale de 2 000 × g. Ces concentrateurs ne sont pas recommandés pour une utilisation avec des rotors à angle fixe.

La force centrifuge, la température, le volume de l'échantillon, la concentration et la viscosité influencent tous la vitesse de filtration. Le temps de centrifugation doit donc être optimisé pour chaque application.