Thermo Scientific™ Pierce™ S-Nitrosylation Western Blot Kit and HENS Buffer

La S-nitrosylation est une modification post-translationnelle qui régule de nombreux processus, notamment la prolifération cellulaire, l’apoptose, la relaxation musculaire lisse, la libération de neurotransmetteurs et la différenciation. Pendant la S-nitrosylation, les radicaux d’oxyde nitrique réagissent avec les thiols de cystéine pour produire un adduit S-NO altérant l’activité protéique.

Kit de transfert Western S-Nitrosylation Pierce
Le kit de transfert Western S-Nitrosylation Pierce contient les réactifs nécessaires pour réaliser une version modifiée de l’essai traditionnel de commutation de la S-nitrosylation, y compris un réactif bloquant la cystéine, un agent réducteur, un tampon de réaction, un réactif de marquage iodoTMT et un anticorps anti-TMT. Le marquage est réalisé en utilisant le réactif non biologique iodoTMT en lieu et place de la biotine-HPDP, ce qui permet de réduire le signal de fond lors de la détection par transfert Western. En plus de la détection des protéines S-nitrosylées par transfert Western, une résine anti-TMT immobilisée peut être utilisée pour enrichir de manière sélective les protéines / peptides S-nitrosylés marqués avec des réactifs iodoTMT. Ce flux de travail permet la cartographie de site de la S-nitrosylation et la quantification multiplexée à l’aide de la spectrométrie de masse.

Les caractéristiques du kit de transfert Western S-Nitrosylation Pierce sont les suivantes :
• Spécifique : les réactions de marquage optimisées commutent les modifications post-translationnelles de la S-nitrosocystéine avec le réactif iodoTMT pour une détection facile par transfert Western à l’aide d’un anticorps anti-TMT
• Meilleur rapport signal-bruit : utilise un réactif iodoTMT non biologique pour le marquage au lieu de la biotine-HPDP, ce qui réduit le bruit de fond lors de la détection par transfert Western
• Compatible avec le flux de travaux : la méthode de marquage est compatible avec d’autres méthodes d’analyse, y compris l’enrichissement via une résine anti-TMT et l’analyse quantitative multiplexée par spectrométrie de masse
• Pratique : tous les réactifs nécessaires sont inclus dans un kit

Tampon HENS
Le tampon HENS est composé de 100 mM HEPES (pH 7,8), 1 mM EDTA, 0,1 mM Neocuproine et 1 % SDS. Il s’agit d’un tampon de lyse cellulaire destiné à être utilisé avec le kit de transfert Western S-Nitrosylation Pierce, qui permet une détection sensible des modifications post-translationnelles de la protéine S-nitrosocystéine dans un kit complet et facile à utiliser.