Thermo Scientific™ Pierce™ Strong Cation Exchange and Strong Anion Exchange Spin Columns

Les colonnes de centrifugation d’échange de cations forts et d’échange d’anions forts Pierce utilisent l’adsorption membranaire comme méthode chromatographique de choix pour fractionner les protéines en fonction de leurs différences de charge. La matrice de colonne a une structure très poreuse, avec des pores de plus de 3 000 nm, ce qui donne aux protéines une accessibilité disponible aux ligands chargés de la membrane. Ces membranes adsorptives maintiennent une grande efficacité à des débits élevés et lors du fractionnement de grandes biomolécules avec de petites diffusivités.

La chromatographie d’échange d’ions est largement préférée dans le pré-fractionnement ou la purification d’une protéine cible à partir d’échantillons biologiques bruts. Les interactions entre les molécules et les sites actifs sur la membrane échangeuse d’ions se produisent de manière convective puisque les échantillons passent à travers les pores, puis ce mécanisme raccourcit le temps de diffusion comparé au fluide à l’intérieur des pores d’une particule de résine. De plus, les conditions relativement douces de liaison et d’élution de cette méthode de séparation permettent une récupération protéique élevée avec une activité biologique intacte. Les colonnes de centrifugation d’échange d’ions forts Pierce permettent un fractionnement rapide des protéines et une préparation d’échantillons en fonction des différences de charge. Il existe deux formats disponibles :
• Mini-format : pour une liaison jusqu’à 4 mg (capacité de 500 µl)
• Format maxi : pour une liaison jusqu’à 80 mg (capacité de 20 ml)

Caractéristiques des colonnes de centrifugation d’échange d’ions forts Pierce :
• Rapide et simple : le format de centrifugation basé sur les membranes élimine le remplissage de colonne
• Pratique et expansif : le format de centrifugation permet le traitement pratique de plusieurs échantillons en parallèle
• Robuste : les membranes adsorbeuses des colonnes de centrifugation ne se fissurent pas et ne s’assèchent pas
• Faible volume de lit : les faibles volumes de lit des membranes adsorbeuses rendent possible le travail avec de faibles volumes de tampon, ce qui entraîne des fractions d’élution concentrées

Applications de colonne de centrifugation d’échange d’ions forts
• Pré-fractionnement des protéines dans du lysat
• Reconnaissance des conditions de purification pour les nouveaux protocoles de préparation des protéines
• Retrait des endotoxines des anticorps monoclonaux
• Polissage des protéines marquées à l’histidine après la chromatographie de chélates métalliques
• Purification et concentration des protéines
• Purification des anticorps du sérum, ascites ou surnageant de la culture de tissu
• Élimination du détergent des solutions protéiques
• Préparation des échantillons avant PAGE 1D ou 2D
• Purification des phosphopeptides avant l’analyse MS