Invitrogen™ Kit SYBR™ Green Fast Advanced Cells-to-CT™

Le kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct est un système complet de lysat cellulaire conçu pour l’analyse de l’expression génétique directement à partir de cellules cultivées sans purification d’ARN. Les réactifs de lyse cellulaire SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct sont fournis avec le mélange enzymatique de transcription inverse Cells-to-Ct Fast Advanced de la plus haute sensibilité, le tampon RT 2X et le mélange PowerUp SYBR Green Master Mix haute qualité. Le kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct vous offre la sensibilité dont vous avez besoin dans le flux de travail le plus rapide disponible : obtenez les résultats d’analyse des expressions génétiques d’une plaque complète de cellules en environ une heure et demie.

• Complet : le flux de travail optimisé comprend des réactifs de lyse cellulaire avec élimination de l’ADNg, un nouveau mélange enzymatique de RT Fast Advanced, un tampon et le nouveau mélange PowerUp SYBR Green Master Mix
• Rapide : préparation des échantillons en 7 minutes, y compris le traitement DNase, à température ambiante•
Facile : effectuez la lyse des échantillons dans un tube ou directement dans des plaques de culture
• Robuste : réalisez l’analyse de l’expression génétique de 10 à 100 000 cellules par échantillon, résultats équivalents à ceux obtenus à partir de l’ARN purifié•
Efficace : contient suffisamment de réactifs pour générer 1 000 résultats de PCR en temps réel à partir de 100 échantillons de départ

Une méthode unique élimine le besoin d’isoler l’ARN des cellules cultivées
La méthode Cells-to-Ct comprend un réactif de lyse unique qui lyse les cellules et protège l’ARN. L’élimination de l’ADN se produit simultanément à l’étape de lyse de 5 minutes pour gagner du temps et améliorer la facilité d’utilisation. La lyse est ensuite arrêtée par l’ajout d’une “solution d’arrêt” qui se lie de façon irréversible aux réactifs de lyse.

Le kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT contient des réactifs de transcription inverse (RT) Cells-to-Ct Fast Advanced pour la synthèse d’ADNc et le mélange PowerUp SYBR Green Master Mix pour l’analyse PCR en temps réel. Les ensembles d’amorces sont fournis par l’utilisateur.

Préparation des échantillons simple en 7 minutes
Le kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT est conçu pour 10 à 100 000 cellules en culture / échantillon. Les cellules sont nettoyées dans du PBS et lysées dans une solution de lyse pendant cinq minutes à température ambiante ; le traitement par DNase peut être réalisé simultanément. La lyse est terminée à température ambiante par une incubation de 2 minutes avec une solution d’arrêt. Les lysats sont maintenant prêts pour la transcription inverse ou la conservation à -20°C pour un court terme ou -80°C pour un long terme.

Maximisez la sensibilité de la détection
Contrairement à certains kits concurrents qui limitent la quantité de lysat dans la réaction de RT à 10 %, le kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT peut accueillir 45 % du volume total de la réaction de RT sous forme de lysat cellulaire. En outre, l’ADNc peut composer jusqu’à 30 % du volume de réaction de PCR en temps réel. Le grand volume de lysat dans la réaction RT optimisée, associé à un grand volume d’ADNc lors de la PCR en temps réel subséquente qui utilise le mélange PowerUP SYBR Green Master Mix, mène à une sensibilité maximale. Le Master Mix amplifie la cible avec précision et exactitude, ce qui permet de détecter de petites quantités de cibles, telles que les transcrits exprimés à de faibles niveaux.

Réduction des pertes d’échantillons et des erreurs de transfert
Étant donné que les échantillons peuvent être traités directement dans des puits de culture (96 ou 384 puits), la manipulation des échantillons et le risque de perte des échantillons ou d’erreur de transfert sont minimisés, ce qui contribue à un traitement à haut débit rapide. Contrairement aux anciens protocoles d’isolement de l’ARN en plusieurs étapes, aucune étape de chauffage, lavage ou centrifugation n’est nécessaire. Le kit simplifie considérablement un processus laborieux de 30 à 60 minutes et le réduit à 7 minutes.

Performances éprouvées, éprouvées ensemble
Tous les composants du kit SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT ont été optimisés pour des performances constantes et fiables. Cela supprime les approximations impliquées dans l’assemblage de kits de préparation des échantillons, de RT et de PCR en temps réel séparés, ce qui vous donne la sensibilité dont vous avez besoin dans le flux de travail d’échantillonnage à réponse le plus rapide disponible.