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TaqMan™ Kit de synthèse cDNA micro-ARN avancé TaqMan™
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Description
Le kit de synthèse d’ADNc Applied Biosystems™ TaqMan™ Advanced miRNA utilise une chimie de transcription inverse (RT) universelle pour préparer le modèle d’ADNc destiné à une utilisation avec les dosages TaqMan™ Advanced miRNA pour la détection et l’évaluation quantitative de micro-ARN humains matures dans des échantillons biologiques.
Le kit de synthèse d’ADNc TaqMan Advanced miRNA utilise une extension homopolymérique de poly-A 3’ et une ligature 5’ d’une séquence adaptatrice afin d’allonger les micro-ARN matures présents dans l’échantillon à chaque extrémité avant la transcription inverse. Les amorces RT universelles reconnaissent les séquences universelles présentes aux deux extrémités prolongées 5’ et 3’ des micro-ARN matures. Tous les micro-ARN matures de l’échantillon subissent une transcription inverse en ADNc.
Afin d’améliorer la détection des cibles de micro-ARN à faible expression, l’ADNc est ensuite amplifié à l’aide d’amorces miR-Amp universelles et du mélange maître miR-Amp afin d’augmenter de manière uniforme la quantité d’ADNc de chaque cible, tout en maintenant les niveaux d’expression différentiels relatifs. Contrairement à la pré-amplification classique, les amorces miR-Amp universelles reconnaissent les séquences universelles ajoutées à tous les micro-ARN matures aux extrémités 5’ et 3’, garantissant l’absence de tout biais d’amplification.
- Sensibilité : haute sensibilité qui permet l’évaluation quantitative de cibles de micro-ARN à faible expression, spécialement dans les liquides biologiques tels que le plasma, le sérum et les tissus
- Flexibilité : la chimie RT universelle produit des modèles d’ADNc universels pour tous les micro-ARN présents dans l’échantillon, offrant une flexibilité à la conception de l’étude
- Économies d’échantillons : requiert uniquement 2 μl d’entrée d’échantillon de plasma / sérum et génère suffisamment d’ADNc pour 600 réactions de qPCR (20 μl) ou 1200 réactions de qPCR (10 μl)
- Spécificité : étape de ligature 5’ qui permet une discrimination des paires de base simples sur toute la séquence du micro-ARN, y compris les disparités à l’extrémité 5’ difficiles à détecter
- Chimie TaqMan de référence : Ce kit est conçu pour une utilisation avec les dosages TaqMan™ Advanced miRNA pour PCR quantitative, qui s’appuient sur la ligne de conception et le système de validation des dosages bio-informatiques leaders sur le marché de Thermo Fisher Scientific pour contribuer à garantir une haute efficacité et une réactivité croisée minimale, même pour les familles de micro-ARN étroitement liées.
Informations sur la commande
Remarque : le kit de synthèse d’ADNc TaqMan Advanced miRNA n’est pas compatible avec les dosages de micro-ARN TaqMan de première génération pour la PCR quantitative. Pour la transcription inverse des cibles de micro-ARN à l’aide d’amorces RT spécifiques aux micro-ARN. Conditions d’expédition : Glace carbonique
Spécification
Spécification
| Contenu et stockage | • 10X PolyA Buffer • ATP, 10mM • Poly A Enzyme, 5 U/μL • 5X Ligase Buffer • RNA Ligase, 10 U/μL • 50% PEG 8000 • 25X Ligation Adaptor • 10X RT Enzyme Mix • 20X Universal RT Primer • dNTP Mix, 100mM • 20X miR-Amp Primer Mix • 5X RT Buffer • 2X miR-Amp Master Mix Store all at -5 to -30°C, except 2X miR-Amp Master Mix which is stored at 2–8°C. |
| Méthode de détection | Amorce-sonde |
| GC-Rich PCR Performance | Élevé |
| Méthode PCR | qPCR |
| Vitesse de réaction | Étalon |
| À utiliser avec (équipement) | 7500 System, 7500 Fast System, 7900HT System, StepOne™, StepOnePlus™, ViiA™ 7 System, QuantStudio™ 3, QuantStudio™ 5, QuantStudio™ 6 Flex, QuantStudio™ 7 Flex, QuantStudio 6 Pro, QuantStudio 7 Pro, QuantStudio™ 12k Flex, QuantStudio™ Absolute Q Digital PCR System |
| Température de réaction optimale | 42°C |
| Gamme de produits | TaqMan™ |
| Type de produit | Kit de synthèse d’ADNc |
| Quantité | 50 réactions |
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Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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