Thermo Scientific™ CpG Methylated Jurkat Genomic DNA

L’ADN génomique a été isolé à partir de cellules Jurkat E6.1 (leucémie aiguë des cellules T humaines, clone E6.1) et a été cultivé en confluence dans des milieux RPMI complétés par 10 % de sérum de veau fœtal. L’ADN génomique isolé a été traité avec la méthyltransférase CpG, repurifiée et dissoute dans un tampon TE.≥Taux de 98 % de méthylation CpG confirmé par séquençage de bisulfite.

L’ADN génomique CpG méthylé de Jurkat Thermo Scientific est un ADN génomique humain masculin provenant de cellules Jurkat, méthylé par une méthode enzymatique avec la méthyltransférase CpG (M.SssI). L’ADN génomique a été isolé à partir de cellules Jurkat (leucémie aiguë des cellules T humaines) et a été cultivé en confluence dans des milieux RPMI complétés par 10 % de sérum de veau fœtal. L’ADN génomique isolé a été traité avec la méthyltransférase CpG, repurifiée et dissoute dans un tampon TE. ≥Taux de 98 % de méthylation CpG confirmé par séquençage de bisulfite.

Points clés

• Pur : ADN exempt d’inhibiteurs, de protéines et d’ARN
• Pratique : prêt à utiliser en concentration de 100 ng / μl
• Compatible avec des applications en aval
• Méthylation complète des cytosines dans les dinucléotides CpG
  Applications
• Utilisés comme contrôles dans les cas suivants :
• Séquençage de bisulfite
• Analyse combinée des restrictions au bisulfite (COBRA)
• Extension d’amorce de nucléotide simple sensible à la méthylation (MS-SNuPE)

Rapport A260 / 230 : ≥2
Rapport A260 / 280 : 1,75 à 1,98
Dangereux : Non
Contrôle de la qualité :

• Une bande prédominante >de 30 kb est observée lors de l’électrophorèse sur gel d’agarose. La concentration d’ADN est déterminée par spectrophotométrie. L’absence de nucléases est confirmée par des tests d’oligonucléotides marqués.
• L’ADN méthylé de CPG a été protégé de la digestion par l’enzyme de restriction sensible à la méthylation HpaII, tel que déterminé par l’analyse qPCR. Suite à la qPCR, des valeurs Cq équivalentes pour le HpaII digéré et l’ADN non digéré témoin.
• La pureté de l’ADN est confirmée par un test qPCR fonctionnel dans lequel les valeurs Cq de l’ADN modèle digéré MspI et HpaII doivent différer de ≥ 5 cycles.
• L’absence d’ADN mycoplasmique est confirmée par PCR.

Comme contrôles dans le séquençage de bisulfite, Analyse combinée des restrictions au bisulfite (COBRA), Extension d’amorce de nucléotide simple sensible à la méthylation (MS-SNuPE)