Thermo Scientific™ Pierce™ Firefly Luc One-Step Glow Assay Kit

Le kit de test Luc Glow en une étape Thermo Scientific Pierce Firefly mesure l’activité de la luciférase de luciole dans la culture de cellules de mammifères en une seule étape d’ajout de réactif, ce qui en fait un dispositif idéal pour les applications de criblage à haut débit (HTS).

Ce kit d’analyse de luciférase de type luminescent est conçu pour être utilisé avec des cellules de mammifères cultivées qui sont transfectées avec des vecteurs exprimant l’enzyme rapporteur de luciférase de luciole approprié. Plusieurs caractéristiques rendent le kit particulièrement adapté aux luminomètres sans injecteurs et aux applications de criblage à haut débit (HTS). Le protocole pratique, homogène et en une seule étape minimise les étapes de manipulation pour prendre en charge l’automatisation. Il vous suffit de combiner la solution de substrat et le tampon de dosage fournis pour créer une solution de travail unique, puis de l’ajouter aux puits de microplaques qui contiennent les cellules traitées transfectées. La sortie de signal stable (luminescente) de ce système offre une flexibilité en termes de temps d’incubation. Lorsqu’il est utilisé avec les plasmides de luc de luciole de Thermo Scientific, le kit fournit un système de dosage de rapporteur bioluminescent extrêmement sensible pour la détection de l’activité du promoteur ou de la voie.

Points clés :

• Sensible - détection hautement sensible de l’activité de la luciférase de luciole
• Pratique - protocole à une étape, mélange et lecture ; aucun réactif supplémentaire requis
• Stable - augmentation de la demi-vie et de la stabilité du signal par rapport aux tests flash
• Simple - ne nécessite pas de luminomètre avec injecteurs
• Facile à utiliser pour l’automatisation – possibilité de réaliser des dosages à haut débit

Comprend :
tampon de dosage et solution de substrat (100X)
Nécessite :
luciférase Firefly et luminomètre ou autre instrument capable de surveiller la luminescence, comme les lecteurs de microplaques Thermo Scientific Luminoskan Ascent et Varioskan Flash.
Applications :

• Études de promoteurs pour l’analyse des éléments réglementaires cis et trans-agissants
• Sélection de médicaments
• Criblage de siARN et de miARN
• Dosages multiplexés pour étudier les effets hors cible
• Dosages de rapporteurs pour la localisation des protéines
• Analyse de la voie de transduction du signal

Caractéristiques du produit :
la luciférase de luciole est une protéine de 62 kDa produite dans la nature par plusieurs espèces de la famille des coléoptères Lampyridae, qui comprend les genres Photinus et Luciola. La luciférase Firefly rouge Thermo Scientific possède une plage d’émission de 560-700 nm (λmax = 613 nm). Le signal bioluminescent de la luciférase de luciole est issu de l’oxydation de la D-luciférine. Le rendement lumineux capté à l’aide d’un luminomètre peut être corrélé avec la quantité de protéine luciférase de luciole produite et utilisé pour déterminer l’activité du promoteur dirigeant l’expression de la luciférase de luciole. La bioluminescence de la luciférase de luciole fournit aux chercheurs un dosage non radioactif pour mesurer l’activité transcriptionnelle des éléments réglementaires. L’activité du rapporteur de la luciférase de luciole peut être utilisée pour déterminer l’activité du promoteur, étudier l’activité de la voie en amont dans la cellule ou déterminer l’effet des activateurs ou des inhibiteurs.