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Description
Includes
- DNase I, sans RNase (1 U/μl) : 250 μl
- Tampon de réaction 10X avec MgCl2 : 1 ml
- Réactif d’élimination de la DNase (RRC ) : 500 μl
- Eau, sans nucléase : 2 x 1,25 ml
Le kit d’extraction d’ADN Thermo Scientific™ RapidOut élimine rapidement et en toute sécurité l’ADN génomique des préparations d’ARN total et d’ARNm. La digestion complète de l’ADN et l’élimination sûre de la DNase I de la réaction de digestion sont assurées sans étape destructrice de l’ARN, telles que le chauffage ou l’extraction organique. Tout d’abord, l’échantillon d’ARN est traité avec de la DNase I exempte de RNase recombinante à des niveaux inférieurs à la limite de détection par PCR de routine. La DNase I est supprimée en toute sécurité par la suite à l’aide du réactif d’élimination de la DNase (RRC) exclusif.
Le RRC lie efficacement la DNase I et le complexe est recueilli au fond du tube par centrifugation. L’ARN purifié est collecté comme un surnageant. La procédure ARN après RapidOut est exempte de contamination par l’ADN et exempte de DNase I. Elle est prête à être utilisée dans différentes applications, notamment la RT-PCR en temps réel ou en point final, le clonage, les microarrays et le transfert Northern.
Le kit d’extraction d’ADN Thermo Scientific RapidOut élimine rapidement et en toute sécurité l’ADN génomique des préparations d’ARN total et d’ARNm. La digestion complète de l’ADN et l’élimination sûre de la DNase I de la réaction de digestion sont assurées sans aucune étape d’endommagement de l’ARN, comme le chauffage ou l’extraction organique. Tout d’abord, l’échantillon d’ARN est traité avec de la DNase I exempte de RNase recombinante à des niveaux inférieurs à la limite de détection par PCR de routine. La DNase I est supprimée en toute sécurité par la suite à l’aide du réactif de suppression de DNase (RRC) exclusif.
La RRC lie efficacement la DNase I et le complexe est recueilli au fond du tube par centrifugation. L’ARN purifié est collecté comme un surnageant. La procédure ARN après RapidOut est exempte de contamination par l’ADN et exempte de DNase I. Elle est prête à être utilisée dans différentes applications, notamment la RT-PCR en temps réel ou en point final, le clonage, les microarrays et le transfert Northern.
Points clés
Applications
Applications principales
Dangereux : non
> Contrôle qualité :dosage de ribonucléase
>Pour le RRC :>
> Aucune RNase contaminante n’a été détectée après incubation de 10 μl de RRC avec 160 ng de transcription d’ARN de 2 kb pendant 4 heures à 37°C.
>Pour la DNase I :>
> Aucune RNase contaminante n’a été détectée après l’incubation de 5 u de DNase I avec 160 ng de transcription d’ARN de 2 kb pendant 4 heures à 37°C.
>Efficacité d’élimination de la DNase I
> L’échantillon d’ARN après la procédure de RapidOut a été incubé avec 1 μg d’ADN plasmide surenroulé pendant 15 minutes à 37°C. Moins de 20 % de l’ADN surenroulé a été transformé en formes entaillées et linéaires.
>Test fonctionnel
>Du kit :>
> Le RRC est testé de manière fonctionnelle dans la réaction d’amplification RT-qPCR avec de l’ARN traité avec le kit d’élimination d’ADN RapidOut.
>De DNase I :>
> La DNase I est testée de manière fonctionnelle dans un essai d’activité unitaire : une unité de l’enzyme dégrade complètement 1 μg d’ADN de la pUC19 en 10 min à 37°C.
> Stockage : -20°C
Applications principales
- Isolement d’ARN et analyse d’ARN, en particulier RT-qPCR et RT-PCR (clients effectuant une analyse d’expression de gènes de faible niveau de transcription
- Clients effectuant la synthèse de l’ADNc-ds à partir de préps d’ARN total
- Élimination de l’ADN de l’ARN pour microinjections et transfection
- Élimination de l’ADN à partir de l’ARN avant l’analyse des microarrays
- Élimination de l’ADN de l’ARN avant l’analyse du transfert Northern
Specifications
Specifications
| Enzymes | DNase |
| Quantité | 50 préparations |
| Type de produit | Kit d’élimination |
Usage exclusivement réservé à la recherche. Ne pas utiliser pour des procédures de diagnostic.
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